miR-30e-5p靶向调控GRP78对宫颈鳞癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响

摘要

目的 探讨miR-30e-5p靶向调控葡萄糖调节蛋白78(GRP78)对宫颈鳞癌细胞SiHa的生物学行为的影响。方法 收集正常宫颈组织40例、宫颈鳞癌组织60例，采用免疫组化法检测GRP78的表达情况，采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)对2组不同宫颈组织中miR-30e-5p、GRP78 mRNA表达进行检测，并分析其与临床病理特征之间的关系。运用生物信息学网站预测GRP78的上游miRNA,双萤光素酶报告基因实验验证两者靶向关系。过表达miR-30e-5p,通过RT-qPCR和蛋白质印迹实验(Western blot)检测SiHa细胞中GRP78 mRNA和蛋白的表达情况，并采用CCK-8实验、划痕实验、Transwell实验检测细胞增殖、迁移和侵袭的能力。结果 免疫组化结果表明，在宫颈鳞癌组织中GRP78蛋白阳性率显著高于正常宫颈组织(P<0.05)。RT-qPCR结果表明，与正常宫颈组织相比，宫颈鳞癌组织中miR-30e-5p的表达降低，而GRP78的表达升高(P<0.05)。宫颈鳞癌组织中miR-30e-5p、GRP78 mRNA的表达水平与分化程度、淋巴结转移显著相关，其中miR-30e-5p表达水平还与脉管浸润有关。双萤光素酶报告基因实验证实miR-30e-5p与GRP78之间存在靶向关系，SiHa细胞中的miR-30e-5p过表达后，GRP78 mRNA及蛋白表达水平随之下降。细胞功能实验表明，过表达miR-30e-5p后SiHa细胞的增殖、迁移和侵袭能力均受到不同程度抑制。结论 miR-30e-5p在宫颈鳞癌组织中表达量较低，而GRP78呈现高表达状态，并且两者均与分化程度、淋巴结转移显著相关。miR-30e-5p与GRP78存在靶向关系，过表达miR-30e-5p后GRP78表达随之下调，从而抑制宫颈鳞癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力。

关键词

宫颈鳞癌 / miR-30e-5p / 葡萄糖调节蛋白78 / 增殖 / 迁移 / 侵袭

基金资助

江苏省十四五医学重点学科(ZDXK202237); 徐州市科技项目(KC23181); 徐州医科大学附属医院发展基金(XYFM202206)