M2型肿瘤相关性巨噬细胞通过TGF-β1/MYO1B调节人膀胱癌细胞迁移及侵袭的研究

摘要

目的 初步探究肿瘤相关性巨噬细胞对人膀胱癌细胞迁移及侵袭的影响及机制。方法 以佛波酯(PMA)刺激THP-1细胞贴壁，再通过白细胞介素(IL)4、IL-13诱导细胞向M2型肿瘤相关性巨噬细胞(M2 TAM)极化，建立M2 TAM模型。采用0.4μm Transwell小室将其与膀胱癌细胞系非接触式共培养，通过ELISA检测共培养上清液中转化生长因子-β1(TGF-β1)含量。Western blot检测人膀胱癌细胞(单独培养组、M2 TAM共培养组、M2 TAM联合TGF-β1中和抗体共培养组)中肌球蛋白ⅠB(MYO1B)的表达。通过划痕实验、Transwell侵袭实验分别检测M2 TAM上清液(及联合TGF-β1中和抗体)处理后人膀胱癌细胞的迁移及侵袭能力，以及MYO1B过表达及干扰后的迁移及侵袭情况。结果 成功构建M2 TAM模型；M2 TAM共培养上清液中TGF-β1含量显著高于对照组(P<0.001);与M2 TAM共培养72 h后，T24、5637膀胱癌细胞迁移率及穿膜个数均显著升高(P<0.01),且细胞内MYO1B蛋白表达高于对照组。加入TGF-β1中和抗体后，T24、5637细胞迁移率、穿膜个数及MYO1B蛋白表达较共培养组均明显降低(P<0.001);MYO1B过表达组T24、5637细胞迁移率及穿膜个数显著高于对照组及空载体转染组，干扰组则显著降低(P<0.001)。结论 M2 TAM可通过分泌TGF-β1,上调膀胱癌细胞内MYO1B蛋白表达，促进膀胱癌细胞的迁移和侵袭。

关键词

膀胱癌 / 肿瘤相关性巨噬细胞 / 肌球蛋白ⅠB / 转化生长因子-β1