μ-阿片受体在Herkinorin调节大鼠原代神经元氧糖剥夺/复氧损伤中的作用及其与β-arrestin 2的关系

摘要

目的 探讨μ-阿片受体(MOR)在Herkinorin调节大鼠原代神经元氧糖剥夺/复氧(OGD/R)损伤中的作用及其与β-arrestin 2的关系。方法 将大鼠原代神经元分为对照(Control)组，OGD/R组和Herkinorin 0.1、0.5和1μmol/L组。采用预孵育24 h、氧糖剥夺2 h、复氧24 h的方法制备OGD/R模型。Herkinorin组分别于预孵育开始及OGD/R即刻加入相应终浓度的Herkinorin。通过慢病毒转染敲减β-arrestin2基因，进一步探究MOR和β-arrestin2的关系。使用流式细胞术检测神经元凋亡，ELISA检测神经元上清白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平，Western blot检测各组神经元细胞膜和细胞质中MOR和κ阿片受体(KOR)表达水平，免疫荧光检测细胞膜和细胞质中MOR和KOR的分布情况。评估β-arrestin2敲减后Herkinorin对MOR分布及OGD/R损伤的影响。结果 与Control组相比，OGD/R组神经元凋亡率及IL-6、TNF-α的分泌水平显著升高，细胞质中MOR水平显著降低(P<0.05)。Herkinorin能显著降低OGD/R神经元的凋亡率和炎性因子分泌，且呈浓度依赖性(P<0.05)。Herkinorin 1μmol/L组神经元细胞膜MOR水平升高(P<0.05)。各组神经元中，KOR在细胞膜和细胞质中的表达差异无统计学意义(P>0.05)。β-arrestin2基因敲减后，与shRNA-NC组相比，shRNA-β-arrestin2组神经元的凋亡率升高，细胞膜MOR水平升高，细胞质MOR水平降低(P<0.05)。结论 Herkinorin可能通过调节MOR在细胞膜和细胞质的分布，减轻大鼠原代神经元OGD/R损伤，该作用可能与β-arrestin2密切相关。

关键词

Herkinorin / μ阿片受体 / β-arrestin2 / 大脑 / 氧糖剥夺 / 复氧