核糖核蛋白自身抗原抗体抑制结直肠癌细胞增殖及迁移侵袭的机制研究

摘要

目的 探讨核糖核蛋白自身抗原抗体(TRIM21)在结直肠癌中的表达情况及其对结直肠癌细胞增殖、迁移、侵袭能力的影响。方法 利用临床蛋白质组学肿瘤分析联盟(CPTAC)数据库和免疫组织化学技术分析TRIM21在结直肠癌组织和癌旁组织中的表达情况。通过费希尔精确检验研究TRIM21在结直肠癌中的表达与临床病理特征之间的关系。采用Kaplan-Meier生存分析和Log-rank检验探究TRIM21表达与结直肠癌患者预后之间的关系。使用2种质粒(NC质粒、TRIM21过表达质粒)和小干扰RNA(siCtrl、siTRIM21-1、siTRIM21-2)分别转染2种结直肠癌细胞株HCT-116和LoVo,构建过表达和敲减TRIM21的结直肠癌细胞株。通过CCK-8、细胞克隆形成实验分析TRIM21对结直肠癌细胞增殖的影响。通过蛋白免疫印迹(Western blot)检测TRIM21对结直肠癌细胞周期相关蛋白表达的影响。通过Transwell实验分析过表达和敲减TRIM21对上述2种结直肠癌细胞迁移、侵袭能力的影响。使用Western blot检测过表达和敲减TRIM21对结直肠癌细胞上皮-间充质转化(EMT)相关蛋白的影响。结果 与癌旁组织相比，结直肠癌组织中TRIM21表达显著下调，其表达水平的降低与不良的临床病理特征和患者较短的总体生存期(OS)、疾病特异生存期(DSS)有关(P<0.001)。与NC组相比，过表达TRIM21组结直肠癌细胞的增殖、迁移、侵袭能力降低，细胞周期蛋白E2(cyclin E2)和细胞周期蛋白D1(cyclin D1)表达水平降低，p21水平升高，EMT相关蛋白N-cadherin和Snail表达水平降低，E-cadherin蛋白升高；与siCtrl组相比，siTRIM21组的结直肠癌细胞增殖、迁移、侵袭能力明显升高，细胞周期相关蛋白cyclin E2和cyclin D1表达水平提高，p21水平下降，EMT相关蛋白N-cadherin和Snail表达水平上升，E-cadherin蛋白水平降低(P<0.05)。结论 TRIM21在结直肠癌组织中低表达，能够抑制结直肠癌细胞增殖、迁移、侵袭能力，其表达水平的降低与不良的临床病理特征和较短的生存期相关。

关键词

结直肠癌 / 核糖核蛋白自身抗原抗体 / 增殖 / 迁移 / 侵袭 / 生存期

基金资助

国家自然科学基金(82504132)