藏红花素通过抑制PI3K/Akt信号通路减轻布比卡因诱导的神经毒性

摘要

目的 探讨藏红花素对布比卡因诱导神经毒性的影响及PI3K/Akt信号通路的作用。方法 常规培养人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞，随机分为对照(Con)组、藏红花素(Cro, 200μmol/L)组、布比卡因(Bup, 1 mmol/L)组和Bup+Cro组。采用MTT法检测细胞活力，Ki67免疫荧光染色检测细胞增殖；流式细胞术检测细胞凋亡；利用相应试剂盒检测Caspase-3、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性和丙二醛(MDA)含量；DCFH-DA法检测细胞活性氧(ROS)产生；Western blot检测细胞凋亡和PI3K/Akt通路相关蛋白表达。结果 布比卡因(0.5、1.0和1.5 mmol/L)以剂量依赖性方式抑制细胞活力(P<0.05),而藏红花素单独处理对细胞活性无显著影响(P>0.05)。Bup+Cro联合处理后，随着藏红花素浓度(50、100和200μmol/L)的升高，细胞活力逐渐增加。与Cro组相比，Bup组细胞增殖明显下降，凋亡率升高，Caspase-3活性、Bax蛋白表达、MDA含量和ROS生成增多，Bcl-2表达、GSH-Px、SOD和CAT活性以及p-Akt/Akt和p-GSK-3β/GSK-3β比率显著降低(P<0.01)。与Bup组相比，Bup+Cro组细胞增殖升高，凋亡率降低，Caspase-3活性、Bax蛋白表达、MDA含量和ROS生成减少，Bcl-2表达、GSH-Px、SOD和CAT活性以及p-Akt/Akt和p-GSK-3β/GSK-3β比率升高(P<0.05)。Akt抑制剂曲西立滨(API)预处理后，Bup+Cro+API组细胞活力降低，细胞凋亡率升高，Caspase-3、Bax表达和ROS生成增多，Bcl-2表达减少(P<0.01)。结论 藏红花素可能通过抑制PI3K/Akt通路激活，促进SH-SY5Y细胞的增殖，抑制细胞凋亡和氧化应激，从而减轻布比卡因诱导的神经毒性。

关键词

布比卡因 / 神经毒性 / 藏红花素 / PI3K/Akt信号通路