基于GC-MS和分子对接探讨五味甘露药浴治疗“真布”病的作用机制

摘要

目的 通过GC-MS和分子对接技术研究藏药五味甘露药浴对治疗“真布”病的潜在作用机制。方法 根据《四部医典》等藏医药古籍文献中记载的五味甘露中药浴的制备工艺对其复方和组方药物进行发酵；通过CO₂超临界流体萃取五味甘露亲脂性部位后用GC-MS法进行成分鉴别，鉴定的化合物依据Conc（浓度）≥0.1且利用Swiss TargetADME数据库选取-6 cm/s≤Log Kp（透皮吸收）≤-2 cm/s获取关键成分，并进一步在Swiss Targetprediction数据库中预测上述关键成分的对应靶点；通过KEGG数据库筛选出“真布”病核心靶标，并将两者靶标制作韦恩图。继而用Schrodinger软件对核心活性成分和核心靶点蛋白进行分子对接验证。结果 未发酵的五种药材共有成分有4种化合物，发酵后增至15种化合物。通过GC-MS对复方发酵样品进行分析，共鉴定出178种化合物；其中89种为单味药材发酵未检出的独有成分。进一步基于浓度（Conc）与透皮吸收系数（Log Kp）的双重筛选标准，从上述178种化合物中筛选出82种关键活性成分，在Swiss Targetprediction有563种化合物靶点和KEGG数据库中获得95种“真布”病的疾病靶标，并在Venny网站中共得11个交集靶标。分子对接结果显示，五味甘露的核心活性成分与核心靶点蛋白MMP1、ITGAL和TEK表现出较好的结合活性，数值达到-5 kcal/mol至-8 kcal/mol。结论 本研究以藏药五味甘露药浴发酵物为对象，核心活性成分通过靶向调控关键靶点网络，实现抑制关节炎症、缓解软骨破坏的抗“真布”病效应，为五味甘露药浴的质量控制、药效评价及抗风湿新药研发提供关键支撑，推动传统藏药从经验应用向机制驱动转化，为藏医药现代化提供“复方解析-靶点验证-临床转化”研究思路。

关键词

五味甘露药浴 / “真布”病 / 类风湿性关节炎 / 气相色谱-质谱(GC-MS) / 网络药理学 / 分子对接

基金资助

国家自然科学基金项目(82460845); 青海省科技厅自然科学基金项目(2022-ZJ-958Q)