乳酸通过胆固醇对非小细胞肺癌细胞中Hedgehog信号通路活性的影响

摘要

目的 观测乳酸通过胆固醇对非小细胞肺癌细胞中Hedgehog(Hh)信号通路活性的影响。方法 本研究用乳酸（0.0 mM、7.5 mM、15.0 mM、20.0 mM）和胆固醇（0μg/mL、25μg/mL、50μg/mL）处理A549、NCI-H1703细胞6、24 h，即刻检测Hh信号通路靶基因、胆固醇代谢合成酶相关基因或蛋白表达水平，并测定细胞内总胆固醇水平；为排除pH值对研究结果的影响，用相同浓度乳酸钠（7.5 mM）处理A549、NCI-H1703细胞24 h，用qPCR法检测胆固醇代谢合成酶相关基因表达水平；通过胆固醇合成酶抑制剂辛伐他汀（0.2μM）和乳酸（0.0 mM、7.5 mM、15.0 mM、20.0 mM）同时处理A549细胞24 h，检测Hh信号通路靶基因表达水平；同时用RTCA DPlus法检测增殖及迁移情况。结果 经乳酸、胆固醇分别处理后的A549、NCl-H1703组细胞与对照组细胞比，前者GLI1、PTCH1 mRNA水平上调（P<0.05）；经乳酸处理后的A549细胞总胆固醇水平和HMGCR、FDFT1、SQLE mRNA水平均升高（P<0.001），同时HMGCR、FDFT1蛋白水平增高；经乳酸及乳酸钠分别处理后的A549、NCl-H1703细胞HMGCR、FDFT1 mRNA水平升高（P<0.01）。用0.2μM辛伐他汀下调胆固醇水平（P<0.05）后，GLI1、PTCH1 mRNA水平下调（P<0.01）；乳酸能够逆转辛伐他汀对GLI1和PTCH1 mRNA水平的抑制作用，对A549细胞增殖（F=3.941,P=0.020）、迁移（F=5.851,P=0.003）能力的抑制作用。结论 乳酸可能通过上调非小细胞肺癌细胞的胆固醇水平，促进Hh信号通路活性，并提高细胞增殖、迁移能力，提示抑制乳酸生成可能会改善辛伐他汀针对非小细胞肺癌的疗效。

关键词

非小细胞肺癌 / 乳酸 / 胆固醇 / 胆固醇合成代谢酶 / Hh信号通路