黑果枸杞花青素单体PrG对H₂O₂诱导的小鼠颗粒细胞氧化损伤的保护机制研究

摘要

目的 探讨黑果枸杞花青素单体矮牵牛花色素-3-O-（6-O-对香豆酰）芸香糖苷-5-O-葡萄糖苷（PrG）对H₂O₂诱导的小鼠颗粒细胞（GCs）氧化损伤的保护机制。方法 将20只ICR雌性小鼠的GCs进行原代培养。将GCs随机分为对照组（Control组）、过氧化氢处理组（H₂O₂组）、PrG处理组（H₂O₂+PrG组）。首先，构建了由不同浓度（0μmol/mL、25μmol/mL、50μmol/mL、100μmol/mL、200μmol/mL、400μmol/mL）、不同作用时间（30 min、60 min、120 min、180 min）H₂O₂诱导的GCs氧化应激损伤模型。随后应用PrG不同浓度（20μg/mL、40μg/mL、80μg/mL）、不同作用时间（12 h、24 h、48 h）处理氧化损伤后的GCs。采用CCK8法筛选H₂O₂与PrG的最佳作用浓度与作用时间，采用EdU法检测H₂O₂诱导的GCs增殖情况，使用DCFH-DA活性氧荧光探针检测GCs内的ROS水平，使用JC-1探针和Mito-tracker Red CMXRos活细胞染料检测线粒体膜电位和线粒体分布。结果 H₂O₂在作用浓度为200μmol/mL、作用时间为2 h时小鼠GCs存活率下降约60%。GCs活力随着PrG浓度的升高而显著升高（P<0.01），且在浓度为80μg/mL时对活性影响最佳。PrG能显著促进GCs增殖能力，降低活性氧水平（P<0.01），增加线粒体分布数量（P<0.01），恢复线粒体膜电位（P<0.01）。结论 黑果枸杞花青素单体PrG通过清除ROS自由基、增强线粒体功能对H₂O₂诱导的小鼠GCs氧化损伤发挥保护作用。

关键词

枸杞 / 花青素 / 矮牵牛花色素苷 / 过氧化氢 / 颗粒细胞 / 氧化损伤