四氢嘧啶对HaCaT细胞活力及AQP3、Claudin-1、ZO-1表达的影响

摘要

目的 研究四氢嘧啶（Ectoine）对人角质形成细胞（HaCaT）的细胞活力、细胞凋亡率和细胞活性氧（ROS）的影响，并分析水通道蛋白3(AQP3)、紧密连接蛋白-1(Claudin-1)、闭锁连接蛋白（ZO-1）的表达水平。方法 设置Ectoine浓度实验组和空白对照组，培养HaCaT细胞（24 h），采用CCK8法检测HaCaT细胞的细胞活力，甄选最佳的Ectoine作用浓度。用Western Blot法检测HaCaT细胞的AQP3、Claudin-1、ZO-1表达水平；用流式细胞仪检测HaCaT细胞的凋亡率及胞内ROS水平。结果 CCK8法检测结果显示，0.10%Ectoine组、0.20%Ectoine组、0.30%Ectoine组的HaCaT细胞活力均高于120%，其中0.20%Ectoine组最高（146.92%±7.67%）。Ectoine浓度实验组相对于空白对照组，HaCaT细胞的AQP3、Claudin-1、ZO-1表达水平明显升高（P<0.05），且细胞凋亡率和胞内ROS水平均明显降低（P<0.05）。结论 Ectoine可提高HaCaT细胞的细胞活力，降低凋亡率和胞内ROS水平，上调AQP3、Claudin-1、ZO-1表达水平。Ectoine可能与相关保湿蛋白的表达相关，对HaCaT细胞具有一定的保护作用。

关键词

四氢嘧啶 / 人角质形成细胞 / 水通道蛋白3 / 紧密连接蛋白-1 / 闭锁连接蛋白

基金资助

青海省基础应用研究计划项目（2022-ZJ-771）; 青海省2022年“昆仑英才·高端创新创业人才”拔尖人才培养项目; 青海大学中青年项目（2020-QNY-5）