经靶向OPN激活的IKBα/NF-κB信号通路对细胞自噬、细胞增殖和细胞周期的影响

摘要

目的 探讨经靶向骨桥蛋白（OPN）激活的IKBα/NF-κB信号通路对低氧环境中肺动脉平滑肌细胞（PASMCs）的自噬、增殖和周期的影响。方法 培养大鼠PASMCs；观察低氧组PASMCs中OPN的表达情况和IKBα/NF-κB的表达情况。将带有OPN（过表达或敲低）的慢病毒与PASMCs共培养，在OPN过表达的PASMCs中加入NF-κB抑制剂QNZ干扰IKBα/NF-κB信号通路，随后在基因和蛋白层面观察OPN对自噬的影响，并在电镜下观察自噬体数量。用5-乙炔基-2-脱氧嘧啶核苷法和流式细胞术检测OPN对细胞增殖能力和细胞周期的影响。结果 低氧组PASMCs表达的OPN高于常氧组（P<0.05），低氧组NF-κB高于常氧组（P<0.05）。常氧组可通过PASMCs过表达OPN激活NF-κB来抑制自噬蛋白LC3B、Beclin1，加入NF-κB抑制剂后可以促进PASMCs的自噬蛋白表达（P<0.05）；干扰低氧组PASMCs中OPN的表达可以进一步促进自噬蛋白和自噬小体的表达（P<0.05）。抑制PASMCs中OPN和NF-κB的表达可以阻断细胞从G0/G1期向S期过渡并减弱由OPN增多引起的增殖（P<0.05）。结论 经靶向OPN可以激活IKBα/NF-κB信号通路；激活的IKBα/NF-κB信号通路对低氧环境中PASMCs的自噬、增殖和细胞周期产生影响。

关键词

骨桥蛋白 / IKBα/NF-κB通路 / 自噬 / 低氧 / 肺动脉平滑肌细胞 / 增殖