miR-153-3p通过靶向KLF5抑制卵巢癌细胞的增殖、迁移、侵袭并促进凋亡

摘要

目的 探究miR-153-3p通过靶向结合KLF5对卵巢癌细胞的增殖、迁移、侵袭及促进凋亡的影响。方法 通过GEPIA软件和Kaplan-Meier曲线分析KLF5在426例卵巢癌组织中的基因表达情况及对卵巢癌患者生存的影响；使用qPCR法检测卵巢癌组织和邻近正常组织以及卵巢癌细胞系中KLF5的基因表达水平；采用Western Blot法检测卵巢癌组织和邻近正常组织以及卵巢癌细胞系中KLF5蛋白的表达水平；采用生物信息学工具和双荧光素酶基因实验确定KLF5的潜在靶基因（miR-153-3p），并通过TCGA数据库分析miR-153-3p表达与卵巢癌患者生存结果之间的相关性。检测miR-153-3p在卵巢癌组织和卵巢癌细胞系中的表达；转染过表达miR-153-3p质粒，检测其对卵巢癌细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡的影响，同时通过qPCR和Western Blot法检测KLF5 mRNA和蛋白表达情况，并检测miR-153-3p与KLF5在卵巢癌组织中的表达情况。恢复KLF5表达后，通过CCK-8、transwell实验和细胞集落形成实验检测miR-153-3p对卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。结果 KLF5基因和蛋白在卵巢癌组织中的表达水平高于邻近正常组织，同时KLF5 mRNA和蛋白在卵巢癌细胞系尤其是OVCAR3、SW626细胞系中表达上调。生物信息学和双荧光素酶基因实验确定KLF5为卵巢癌细胞中miR-153-3p的直接靶基因。miR-153-3p在卵巢癌组织和卵巢癌细胞系中的表达水平明显低于邻近正常卵巢组织和非恶性细胞系中的表达水平，尤其在OVCAR3、SW626细胞系中降低更为明显。转染miR-153-3p后证实miR-153-3p过表达能抑制卵巢癌细胞的增殖、迁移和侵袭，促进卵巢癌细胞凋亡。进一步分析miR-153-3p和KLF5在卵巢癌细胞中的关系，miR-153-3p过表达组（miR-153-3p mimic）的KLF5 mRNA和蛋白与NC-mimic组相比表达率明显降低，miR-153-3p在卵巢癌组织中的表达水平与KLF5水平呈负相关（P<0.0001）。miR-153-3p mimic与pcDNA3.1-KLF5共转染可减轻miR-153-3p过表达对KLF5表达水平的抑制作用；miR-153-3p与pcDNA3.1-KLF5共转染可消除miR-153-3p过表达对卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用，并促进卵巢癌细胞凋亡。结论miR-153-3p靶向结合KLF5抑制卵巢癌细胞的增殖、迁移和侵袭并促进凋亡。

关键词

KLF5 / 卵巢癌 / miR-153-3p / 细胞 / 增殖 / 迁移 / 凋亡