雄黄对食管癌裸鼠KYSE150细胞移植瘤生长的抑制作用及对ROS-ASK1-p38 MAPK通路的影响

摘要

目的 研究雄黄对食管癌裸鼠KYSE150细胞移植瘤生长的抑制作用及对ROSASK1-p38 MAPK通路的影响。方法 建立食管癌裸鼠KYSE150细胞移植瘤模型，观察雄黄对食管癌裸鼠KYSE150细胞移植瘤体积、重量的影响；在显微镜下观察并对比雄黄组和食管癌裸鼠KYSE150细胞移植瘤模型组的病理变化；以免疫荧光实验明确雄黄对食管癌裸鼠KYSE150细胞移植瘤的上皮-间充质转化（EMT）表达机制；以Western Blot实验明确雄黄对食管癌细胞p38/MAPK信号通路的作用机制。结果 不同浓度雄黄可以减少食管癌裸鼠KYSE150细胞移植瘤的体积、降低裸鼠KYSE150细胞移植瘤的重量，并随时间增加而减少（降低）。高浓度雄黄组移植瘤细胞核碎裂、溶解，细胞轮廓不清，细胞结构不清晰，细胞核模糊不清，细胞之间的距离显著增宽；移植瘤生长区域的细胞排列无规律，胞浆丰富，部分细胞核形状变异，可见病理性核分裂象。与食管癌裸鼠KYSE150细胞移植瘤模型组相比，雄黄组E-cadherin荧光强度升高（P<0.01）、N-cadherin荧光强度降低（P<0.05）、Ki-67荧光强度降低（P<0.01）、Slug荧光强度降低（P<0.01）。与食管癌裸鼠KYSE150细胞移植瘤模型组相比，雄黄组中的ASK1抗体、p38 MAPK相对蛋白表达量降低（P<0.05）,p-p38 MAPK相对蛋白表达量降低（P<0.01）。结论 雄黄对食管癌裸鼠KYSE150细胞移植瘤生长的作用：可以抑制食管癌KYSE150细胞移植瘤的生长，并呈浓度、时间依赖性；使细胞形态破坏、细胞核结构发生变化，促进食管癌裸鼠移植瘤细胞凋亡。雄黄对食管癌裸鼠KYSE150细胞移植瘤生长的作用机制：通过抑制EMT而抑制食管癌细胞的转移与侵袭；通过调节ROS-ASK1-p38 MAPK通路抑制食管癌细胞增殖、迁移和生长。

关键词

食管癌 / 雄黄 / 裸鼠 / 移植瘤 / 蛋白印迹实验 / 免疫荧光实验 / HE染色