高原低氧条件下雄性大鼠心脏骤停-心肺复苏后HIF-1α和脑损伤相关因子的动态变化

摘要

目的 阐明高原低氧条件下雄性大鼠心脏骤停-心肺复苏（Cardiac arrest-cardiopulmonary resuscitation,CA-CPR）后缺氧诱导因子-1α(Hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)在海马组织中的时相表达规律；揭示CA-CPR后HIF-1α和脑损伤相关因子S100β蛋白（S100β protein,S100β）、神经元特异性烯醇化酶（Neuron specific enolase,NSE）、髓鞘碱性蛋白（Myelin basic protein,MBP）在血清中的动态变化情况；评估CA-CPR后各时间点海马神经元的病理损伤与凋亡情况。方法 构建高原大鼠CA-CPR模型。采用qRT-PCR、Western Blot及IHC法检测海马组织中HIF-1α的时相表达水平；采用ELISA法检测血清中S100β、NSE、MBP及HIF-1α的浓度；采用HE、TUNEL染色法评估海马神经元病理损伤程度与凋亡率。结果 成功构建高原大鼠CA-CPR模型。海马组织中HIF-1α mRNA及蛋白表达在恢复自主循环（Return of spontaneous circulation,ROSC）2 h时升高（P<0.05），在ROSC12 h时达峰（P<0.05），在ROSC 48 h时下降（P<0.05）;IHC实验结果显示，HIF-1α主要定位于神经元胞质。血清S100β在ROSC 6 h时达峰（P<0.05）,NSE、MBP在ROSC 12 h时同步达峰（P<0.05），三者在ROSC 48 h时下降（P<0.05）；血清中的HIF-1α变化趋势与海马组织中的一致。HE染色结果显示，神经元皱缩、深染，胞质空泡化；在ROSC 24 h时凋亡率达峰（P<0.05）。结论 高原CA-CPR后HIF-1α的表达呈现“ROSC 2 h升高—12 h达峰—48 h下降”的时相特征，并在早期过表达；血清S100β、NSE、MBP的达峰时间存在时相差异；海马神经元损伤程度随时间进展而加重，凋亡率随时间进展而提高。

关键词

高原 / 复苏 / 缺氧诱导因子-1α / S100β蛋白 / 神经元特异性烯醇化酶 / 髓鞘碱性蛋白