四氢嘧啶对H₂O₂诱导的HaCaT细胞氧化应激模型的保护作用及机制

摘要

目的 探讨四氢嘧啶（Ectoine）对过氧化氢（H₂O₂）诱导的人永生化角质形成细胞（HaCaT细胞）氧化应激模型的保护作用及机制。方法 体外培养HaCaT细胞，分为Control组、H₂O₂组、Ectoine+H₂O₂组。采用试剂盒法检测各组细胞存活率，细胞中超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活性、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GSH-Px）活性，活性氧（reactive oxygen species,ROS）水平，丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量；采用RT-qPCR法检测细胞内IL-6、IL-8等相关炎症基因及caspase-3和caspase-9相关凋亡基因mRNA的表达情况。结果 细胞活力检测结果显示，400μmol/L H₂O₂作用于细胞后存活率为（54.91±2.14）%（P<0.05），与H₂O₂组比较，经0.5、5.0、50.0μmol/L Ectoine预处理后，细胞存活率分别为（65.46±1.39）%、（64.40±2.05）%、（66.29±1.56）%，细胞存活率均升高（P<0.05）;ROS、MDA及SOD、GSH-Px检测结果显示，与H₂O₂组比较，Ectoine预处理可提高细胞SOD、GSH-Px活性（P<0.05），降低ROS水平（P<0.05）及MDA含量（P<0.05）;RT-qPCR结果显示，与H₂O₂组比较，Ectoine预处理可降低IL-6、IL-8等相关炎症基因以及caspase-3、caspase-9相关凋亡基因的表达水平（P<0.05）。结论 Ectoine对H₂O₂诱导的HaCaT细胞所致的氧化应激损伤具有明确的保护作用，表现为减少ROS的产生，降低MDA的含量，提高细胞SOD和GSH-Px的活性，并降低炎症和相关凋亡基因的表达。

关键词

四氢嘧啶 / 过氧化氢 / 抗炎 / 抗氧化 / 人永生化角质形成细胞

基金资助

青海大学青年科研基金项目（2020-QYY-8）