抗多房棘球蚴EMY162和副肌球蛋白双特异性人源化抗体的构建及真核表达纯化

史凯丽; 袁智浩; 陈思; 张娜; 祁悦林; 吕慧玲; 王孝平; 汤锋; 李润乐

doi:10.13452/j.cnki.jqmc.2026.02.009

中国高原医学与生物学杂志 ›› 2026, Vol. 47 ›› Issue (2) : 138 -144. DOI: 10.13452/j.cnki.jqmc.2026.02.009

抗多房棘球蚴EMY162和副肌球蛋白双特异性人源化抗体的构建及真核表达纯化

史凯丽, 袁智浩, 陈思, 张娜, 祁悦林, 吕慧玲, 王孝平, 汤锋, 李润乐

作者信息 +

Author information +

文章历史 +

摘要

目的构建抗多房棘球蚴EMY162和副肌球蛋白的双特异性人源化抗体；对双特异性人源化抗体进行真核表达纯化。方法多房棘球蚴EMY162的纳米抗体EMY162-E11与副肌球蛋白的纳米抗体C4-1通过柔性连接肽串联，经密码子优化后克隆至真核表达载体pFUSE-hIgG1-Fc，经双酶切验证后获得重组质粒pFUSE-C4E11-Fc；将重组质粒pFUSE-C4E11-Fc瞬时转染至HEK293细胞，将培养的上清液经rProtein A亲和层析纯化获得目标抗体C4E11-Fc。结果经双酶切验证后获得重组质粒pFUSE-C4E11-Fc；经SDS-PAGE和WB实验推测目的蛋白大小约为54KD，与预测值一致。结论本研究成功构建抗多房棘球蚴EMY162和副肌球蛋白的双特异性人源化抗体，完成了对双特异性人源化抗体的真核表达纯化，为多房棘球蚴双特异性人源化抗体的疗效研究提供了实验基础。

关键词

多房棘球蚴 / 双特异性 / 人源化抗体 / 真核 / 表达

Key words

引用本文

引用格式 ▾

史凯丽, 袁智浩, 陈思, 张娜, 祁悦林, 吕慧玲, 王孝平, 汤锋, 李润乐. 抗多房棘球蚴EMY162和副肌球蛋白双特异性人源化抗体的构建及真核表达纯化[J]. 中国高原医学与生物学杂志, 2026, 47(2): 138-144 DOI:10.13452/j.cnki.jqmc.2026.02.009