H₂O₂抑制ERK通路诱导L-O2细胞铁死亡

摘要

目的：探讨过氧化氢（H₂O₂）诱导人肝实质细胞（L-O2细胞）铁死亡的作用及潜在机制。方法：采用不同浓度梯度H₂O₂刺激L-O2细胞，分别于处理12、24 h后使用CCK-8法检测细胞存活率，从而确定最有效的H₂O₂诱导条件。在实验中设立了以下处理组：空白对照组、H₂O₂组、Erastin组、H₂O₂+Fer-1组；确定H₂O₂可诱导L-O2细胞发生铁死亡，为了进一步明确具体的机制，细胞分为空白对照组、H₂O₂组、H₂O₂+不同浓度的ERK激动剂以及ERK抑制剂，使用试剂盒检测各处理组的细胞死亡情况、ROS水平和MMP水平，利用RT-qPCR检测铁死亡标记物PTGS2和ACSL4 mRNA表达水平。结果：800μmol/L H₂O₂刺激24 h可诱导L-O2细胞死亡；与空白对照组相比，H₂O₂组和Erastin组细胞受损明显，细胞内ROS水平升高、MMP水平显著降低，同时PTGS2和ACSL4 mRNA的表达水平升高；与H₂O₂组相比，H₂O₂+Fer-1组细胞受损减弱，细胞内ROS水平降低、MMP水平恢复，PTGS2和ACSL4 mRNA的表达水平降低。与H₂O₂组相比，H₂O₂+ERK激动剂组细胞受损减弱，细胞内ROS水平降低、MMP水平恢复、PTGS2和ACSL4 mRNA的表达水平降低；然而，加入ERK抑制剂组则出现了相反的结果。结论：800μmol/L的H₂O₂处理24 h能显著诱导L-O2细胞发生铁死亡，且此过程可能主要通过ERK通路的抑制作用来实现。

关键词

铁死亡 / 过氧化氢 / L-O2细胞 / ERK信号通路 / 线粒体膜电位

基金资助

湖北省科技厅青年项目(2021CFB270); 湖北省大学生创新创业训练计划项目(S202210929013); 湖北医药学院研究生科技创新项目(YC2022039)