利用苛养厌氧平板分离牙龈卟啉单胞菌临床菌株及其生物学特性分析

摘要

目的 筛选一种适合牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)生长的固体琼脂培养基，建立能有效、快速分离Pg菌株的方法。方法 通过观察比较Pg标准菌株ATCC 33277在苛养厌氧琼脂平板(FAA)、胰酪大豆胨琼脂平板(TSA)和牛脑心浸液琼脂平板(BHIA)上的生长周期和菌落特点，筛选最佳平板。采集食管癌高发地区1例慢性牙周炎患者牙菌斑，并收集3例食管鳞癌患者的新鲜肿瘤组织，经实时荧光定量PCR(qPCR)鉴定Pg为阳性，在FAA平板上连续划线进行常规厌氧培养。采用革兰氏染色、qPCR和16S rRNA测序等方法初步鉴定分离的临床菌株，并开展生长曲线、药物敏感性及生物膜形成能力测试等实验，进一步研究分离临床菌株的生物学特性。结果 与BHIA和TSA相比，FAA更适合Pg的生长，其灵敏性更高。从口腔中成功分离一株Pg临床菌株，命名为LyG1;食管鳞癌组织中分离一株Pg临床菌株，命名为LyEC01。结论 FAA适合分离、纯化及培养Pg,利用FAA从口腔和食管癌组织中分离出的LyG1和LyEC01临床菌株，与标准菌株的生物学特性存在差异。

关键词

食管癌 / 牙龈卟啉单胞菌 / 苛养厌氧平板 / 临床菌株