miR-4677-3p靶向抑制MMP2对食管鳞癌细胞体外增殖和迁移的影响

摘要

目的 探讨miR-4677-3p靶向调控基质金属蛋白酶-2(MMP2)对食管鳞癌(ESCC)细胞体外增殖和迁移的影响及其分子机制。方法 基于GEO数据库GSE263647数据集，通过生物信息学分析筛选ESCC预后相关的关键基因MMP2，并采用miRWalk和miRDB数据库预测靶向MMP2的miRNA;通过qRT-PCR和Western blot检测人正常食管上皮细胞(HEEC)及4种ESCC细胞系中MMP2的mRNA和蛋白表达水平;利用siRNA转染和慢病毒感染技术分别在KYSE-150和KYSE-70细胞中建立MMP2敲降和过表达模型;通过CCK-8实验评估细胞增殖能力，采用划痕实验检测细胞迁移能力;通过转染miR-4677-3p摸拟物和抑制剂，验证其对MMP2表达的调控作用。结果 筛选出467个差异表达基因和89个潜在调控miRNA,MMP2在ESCC组织及细胞系中显著高表达，且与患者不良预后相关。功能学实验表明:与对照组相比，si-MMP2敲降组细胞的增殖和迁移能力降低，过表达组则相反; miR-4677-3p摸拟物转染使MMP2蛋白表达水平下调，且细胞的增殖和迁移能力降低，miR-4677-3p抑制剂组则相反。结论 miR-4677-3p通过靶向调控MMP2表达，进而调控ESCC细胞的增殖和迁移能力，该分子可能成为ESCC治疗的潜在靶点。

关键词

食管癌 / 生物信息学 / MMP2 / miR-4677-3p / 增殖 / 迁移