牙龈卟啉单胞菌诱导中性粒细胞胞外陷阱促进食管鳞癌转移

摘要

目的 探讨Pg感染对食管鳞状细胞癌（ESCC）肺转移的影响，以及中性粒细胞胞外陷阱（NETs）在其中的作用。方法 将荧光素酶标记的KYSE150细胞（LKC）经尾静脉注射建立裸鼠ESCC肺转移模型。直接感染组（Pg组）接种预先与Pg共同培养的LKC,口腔暴露组（OR组）在接种后用菌液涂抹口腔感染Pg,对照组（CON组）不感染。接种后第3周，每组进一步分为GSK484（+）和GSK484（-）两个亚组，前者腹腔注射NETs阻断剂GSK484,后者注射不含药物的溶剂。于第3周（干预前）及第4～8周每周行活体荧光成像，第8周末取肺行离体荧光成像。收集Pg感染的中性粒细胞培养上清，以Transwell小室检测其对KYSE30细胞侵袭能力的影响。免疫组化检测Ki67、Ly6G表达；免疫荧光检测MPO、Cit-H3表达并行DAPI复染评价NETs形成；流式细胞术检测CD11b⁺、Ly6G⁺中性粒细胞比例。结果 Pg组于第3周即出现肺部荧光信号，此后强度逐渐增强且最为显著，OR组次之，CON组无明显信号。Pg感染中性粒细胞后的培养上清可显著增强KYSE30细胞侵袭能力。Pg组与OR组肺转移灶内及周围Ly6G⁺中性粒细胞显著富集，肺组织中性粒细胞比例升高，MPO与Cit-H3表达增强且共定位增多。GSK484干预可逆转上述变化，干预后肺组织中的中性粒细胞比例与CON组无显著差异。结论 Pg感染可促进ESCC肺转移，该作用依赖肺组织中中性粒细胞的募集及NETs形成；靶向NETs形成可能是阻断ESCC肺转移的潜在策略。

关键词

食管鳞状细胞癌 / 牙龈卟啉单胞菌 / 肺转移 / 中性粒细胞胞外陷阱 / 中性粒细胞

基金资助

河南省国际科技合作重点项目(261111520900); 河南省科技攻关项目(252102310066)