基于TLR4通路研究“黄芩-黄连”对多重耐药性鲍曼不动杆菌肺炎的作用机制

摘要

目的 探讨“黄芩-黄连”药对通过Toll样受体4(TLR4)通路对多重耐药鲍曼不动杆菌(MDRAb)肺炎的作用机制。方法 培养合适人肺泡上皮细胞(HPAEpiC),采用细胞活力检测试剂盒(CCK-8)检测运用MDRAb的脂多糖(LPS)干预前后HPAEpiC细胞的增殖活性改变，采用CCK-8测定不同浓度LPS(0、1.00、20.00、100.00μg/mL)对HPAEpiC细胞的影响。同时采用CCK-8筛选最佳“黄芩-黄连”含药血清浓度。将HPAEpiC细胞分为正常组(HPAEpiC细胞组)、模型组(利用MDRAb的20.00μg/mL LPS处理HPAEpiC 24 h);空白血清组(使用空白血清干预模型24 h)、含药血清组(含10%浓度“黄芩-黄连”血清干预模型24 h)。酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL-10)水平；逆转录定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测细胞核因子-κB(NF-κB)、白细胞介素1受体相关激酶(IRAK)、髓样分化因子88(MyD88)、转化生长因子-β激活激酶1(TAK1)、TLR4水平；蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测TRL4、MyD88、TAK1、白细胞介素1受体相关激酶4(IRAK4)、NF-κB水平。结果 浓度为0～20μg/mL的LPS对HPAEpiC细胞活性无明显影响。与模型组比较，含药血清组中TNF-α降低，IL-10升高(P<0.001);与模型组比较，含药血清组NF-κB、TRL4、MyD88、TAK1、IRAK通路相关蛋白表达均降低(P<0.05)。结论 “黄芩-黄连”药对可能通过抑制TLR4通路，降低多重耐药鲍曼不动杆菌细胞的炎症反应。

关键词

鲍曼不动杆菌 / 肺炎 / 黄芩-黄连 / TRL4 / 炎症反应