刺山柑果实正丁醇提取物对树突状细胞成熟的影响及机制研究

摘要

为探讨刺山柑果实正丁醇相（Capparis spinosa L. fruit n-Butanol Extract, CSBE）对小鼠树突状细胞（Dendritic Cell, DC）成熟的影响及其作用机理，用1、2、3 mg·mL^-1的CSBE处理DC，采用流式细胞术和ELISA检测DC表面标志物、抗原吞噬能力和细胞因子分泌验证DC成熟度．采用液相色谱-质谱联用（LC-MS）鉴定CSBE抗炎活性成分，基于网络药理学分析其在类风湿性关节炎（Rheumatoid Arthritis, RA）的相关靶点．利用String数据库和Cytoscape 3.7.2软件构建关键靶点蛋白质-蛋白质互作（Protein-Protein Interaction, PPI）网络，利用Metascape平台进行GO和KEGG富集分析并用western blot检测相关蛋白的表达．实验结果显示：CSBE单独处理时对DC表面共刺激分子和细胞因子没有显著影响，但显著抑制了细菌脂多糖（Lipopolysaccharides, LPS）诱导的DC表面分子CD40和CD86的表达、细胞因子TNF-α和IL-6的分泌以及基质金属蛋白酶MMP9和MMP13的表达，增加了抗原吞噬能力．LC-MS正离子模式下有49种抗炎化合物，负离子模式下有42种抗炎化合物．抗炎化合物在RA中共有核心靶点包括AKT1、TNF、SRC及MMP9等，其中有机酸类化合物主要关联辅助性T细胞的分化、Th17辅助性细胞的分化、Th17型免疫反应等Th17相关的生物学过程，涉及PI3K-AKT信号通路、Th17细胞分化、HIF-1信号通路和IL-17信号通路等类风湿性关节炎相关的信号通路．CSBE能够抑制DC的成熟及促炎细胞因子的表达，通过降低MMP表达抑制DC迁移，从而发挥免疫抑制及治疗RA的功能．

关键词

刺山柑 / 树突状细胞 / 化学成分 / 免疫抑制 / 网络药理学