N⁶-甲基腺苷（m6A）转移酶METTL3和m6A调控LINC01465在肝细胞癌增殖转移中的作用机制

摘要

目的 探讨甲基转移酶样3(METTL3)在肝癌细胞中调控m6A水平，影响长链非编码(lncRNA)LINC01465的表达，促进肝癌细胞增殖转移的机制。方法 利用人类癌症基因组图谱(TCGA)数据库分析METTL3在肝癌组织和正常肝组织中的表达差异及与患者预后的关系；用Western blot、RT-qPCR分析验证METTL3在细胞、组织中的表达；用m6A比色法验证肝癌细胞及正常肝细胞中的m6A水平；敲低METTL3后进行CCK-8、克隆形成、Transwell迁移、侵袭实验，研究METTL3对肝癌增殖转移的调控作用；转录组RNA m6A甲基化测序确定METTL3的下游调控基因LINC01465。RT-qPCR验证沉默METTL3后LINC01465的表达量，以及LINC01465在肝细胞癌中的表达水平。结果 METTL3在肝癌组织和细胞中明显高表达且与患者预后较差相关；高表达的METTL3促进HCC细胞增殖、迁移和侵袭；METTL3影响LINC01465的m6A水平及其表达量来促进肝细胞癌的发展进程。结论 METTL3可通过m6A依赖的方式来影响LINC01465的表达水平，促进肝癌细胞增殖转移，METTL3可能成为肝癌预后及治疗的靶向标志物。

关键词

甲基转移酶样3 / m6A甲基化 / LINC01465 / 肝细胞癌

基金资助

广西自然科学基金资助项目(NO:2017GXNSFGA198002); 百色市区域多发病联合专项计划项目(NO:20224104)