激酶ULK1对急性T淋巴细胞白血病细胞凋亡作用的研究

摘要

目的 探讨ULK1对急性T淋巴细胞白血病细胞株CEM-C7凋亡的影响及与AMPKα/ULK1轴之间的关系。方法 通过予不同浓度ULK1激活剂LYN-1604(0、1.2、2μmol/L)、ULK1抑制剂MRT68921(0、1.2、2μmol/L)干预CEM-C7细胞24 h,流式细胞术检测各药物浓度对CEM-C7细胞株凋亡率的影响，筛选凋亡最明显的药物浓度进行后续实验，Edu及Soft agar实验检测其对CEM-C7细胞株增殖的影响，流式细胞术检测其对CEM-C7细胞株线粒体膜电位的影响，透射电镜观察其对CEM-C7细胞细胞核及线粒体超微结构变化的影响，Western blot检测激活和抑制ULK1后ULK1、p-ULK1(Ser317)、Caspase3、Cleaved-caspase3、Bcl-2、Bax、PCNA、AMPKα、p-AMPKα(Ser172)的表达情况。结果 ULK1抑制剂及激活剂分别干预CEM-C7细胞24 h以后，与对照组相比，ULK1抑制剂可明显促进CEM-C7细胞发生凋亡，抑制CEM-C7细胞增殖，使细胞线粒体的膜电位明显下降，差异均具有统计学意义(P<0.05);透射电镜可观察到明显的细胞凋亡现象；p-ULK1(Ser317)、p-AMPKα(Ser172)的蛋白水平表达下降，而ULK1激活剂对CEM-C7细胞株无明显影响。结论 ULK1可能通过AMPKα/ULK1轴影响其对CEM-C7细胞的凋亡功能。

关键词

UNC-51样激酶1 / 急性T淋巴细胞白血病 / CEM-C7细胞 / 凋亡