富锌在脂多糖、地塞米松诱导小鼠腭裂中的作用

摘要

目的 研究富锌在脂多糖、地塞米松诱导小鼠腭裂中的作用，并初步探索其发生的可能机制。方法 将120只孕鼠随机分为6组：常锌对照组(C)、脂多糖组(LPS)、地塞米松组(DEX)、富锌组(Zn)、富锌+脂多糖组(ZLPS)、富锌+地塞米松组(ZDEX),胚胎(ED) 0.5 d开始，前3组给予常锌饲料30 mg/kg,后3组给予富锌饲料100 mg/kg; LPS组、ZLPS组ED 8.5 d颈部注射脂多糖0.15 mg/kg, DEX组、ZDEX组ED 10.5 d开始连续3 d同一时间腹腔注射地塞米松6 mg/kg。孕鼠在ED 13.5 d、ED 14.5 d、ED 15.5 d麻醉后脱颈处死，显微镜下观察胎鼠腭部，统计腭裂发生率；HE染色观察腭突的发育状况，免疫组织化学染色检测腭突Sp5、Wiz表达情况；RT-qPCR和WB方法检测腭突Sp5、Wiz、Ptch1、Gli3表达情况。结果 孕鼠暴露于LPS和DEX均会产生腭裂，且DEX处理后发生率更高；ED 13.5 d时，与C组相比，LPS组腭突Sp5阳性表达平均光密度值及Sp5蛋白表达升高(P<0.05),Zn组腭突Sp5、Wiz阳性表达平均光密度值及Sp5蛋白表达下降(P<0.05),而Wiz mRNA升高(P<0.05)。ZLPS组较LPS组腭突Sp5、Wiz阳性表达平均光密度值、Sp5 mRNA及Sp5蛋白表达显著降低(P<0.05),而ZDEX组较DEX组结果则相反(P<0.05);与C组相比，LPS组、Zn组Ptch1 mRNA及Ptch1蛋白表达均升高(P<0.05),但是LPS组Gli3 mRNA表达降低(P<0.05),Zn组Gli3 mRNA表达升高(P<0.05);ZDEX组较DEX组Ptch1 mRNA及其蛋白表达明显增加(P<0.05),Gli3 mRNA表达降低(P<0.05);ZLPS组较LPS组Ptch1 mRNA及其蛋白表达下降(P<0.05)。结论 富锌饮食对孕鼠暴露在LPS引起的腭裂有一定的拮抗作用，可能与调节Sp5、Wiz的表达相关，但对暴露于DEX诱发的腭裂未见明显的拮抗效果。

关键词

腭裂 / 锌 / 预防 / 脂多糖 / 地塞米松 / 锌指蛋白