石斛碱对过氧化氢诱导的RGC-5细胞氧化损伤的保护作用

摘要

目的 研究石斛碱对过氧化氢（H₂O₂）诱导的视神经节细胞氧化损伤的保护作用。方法 将培养的RGC-5细胞分为正常对照组、H₂O₂模型组、石斛碱1 nmol/L组、石斛碱10 nmol/L组及石斛碱100 nmol/L组。采用细胞技术试剂盒-8（CCK-8）检测RGC-5细胞活力；试剂盒法检测细胞中氧化和抗氧化物质的含量、细胞中ROS水平；蛋白免疫印迹法（Western Blot）检测细胞中核因子E2相关因子2 （Nrf2）以及下游靶蛋白表达。结果 石斛碱在1、10、100 nmol/L浓度对RGC-5细胞活力无毒性作用。H₂O₂从200μmol/L浓度开始显著降低RGC-5细胞活力。100 nmol/L石斛碱可显著降低H₂O₂诱导的RGC-5细胞中LDH外漏率、活性氧和丙二醛含量，显著升高超氧化物歧化酶和谷胱甘肽含量。石斛碱可诱导RGC-5细胞中Nrf2从胞浆向胞核转移，同时正向调控其下游抗氧化蛋白GPx1、GCLC、NQO 1和HO-1的蛋白表达。结论 石斛碱对H₂O₂诱导的RGC-5细胞氧化损伤有明显的保护作用，其机制可能是石斛碱促进Nrf2核转位，正向调控Nrf2下游抗氧化蛋白表达发挥抗氧化作用。

关键词

石斛碱 / 视神经节细胞 / 过氧化氢 / 氧化损伤