慢性阻塞性肺疾病模型小鼠中Notch信号通路及上下游调控因子NCSTN和Foxj1的表达

摘要

目的 检测慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型小鼠中气道上皮Notch信号通路、nicastrin(NCSTN)和Foxj1因子的表达。方法 选取36只SPF级KM小鼠，随机分为正常对照组(Normal)和COPD组，各组18只，采用香烟烟熏17周建立COPD小鼠模型。使用苏木精-伊红染色(HE)对各组肺组织和气管组织进行病理观察，计算肺泡的平均截距(MLI)、平均肺泡数(MAN)以及支气管和气管的管壁厚度；采用酶联免疫吸附试验(Elisa)检测血清中的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6);采用免疫组织化学法(IHC)观察各组气管上皮中NCSTN蛋白的定位与表达水平；使用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和免疫印迹(WB)分别测定各组气管上皮NCSTN、Notch1/2/3和Hes1 mRNA和蛋白表达水平，以及Foxj1 mRNA、β-tubulinⅣ蛋白表达水平。结果 相较于Normal组，COPD组小鼠肺组织的MLI明显增大(P<0.05)、MAN明显减少(P<0.05)、肺组织支气管和气管管壁厚度明显增加(P<0.05)、气管结构改变；TNF-α和IL-6水平明显增加(P<0.05);NCSTN蛋白在各组气管上皮均有表达，COPD组NCSTN平均吸光度值明显升高(P<0.05);气管上皮中NCSTN、Notch2/3及Hes1 mRNA和蛋白表达水平明显增加(P<0.05)、Foxj1 mRNA和β-tubulinⅣ蛋白表达水平明显降低(P<0.05),Notch1 mRNA和蛋白表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论 提示COPD模型小鼠气道上皮Foxj1的改变与Notch信号通路上游调控基因NCSTN表达异常相关。

关键词

NCSTN因子 / Notch信号通路 / 慢性阻塞性肺疾病 / 纤毛细胞