过表达Claudin-1对人皮肤鳞癌细胞生物学行为的影响

摘要

目的 构建过表达紧密连接蛋白-1(CLDN1)的人皮肤鳞癌稳转细胞株，并观察CLDN1对人皮肤鳞癌细胞生物学行为的影响。方法 选取处于对数生长期的人永生化角质形成细胞HacaT和人皮肤鳞癌细胞株A431,采用qPCR和Western blot比较CLDN1在两种细胞株中的表达差异。利用慢病毒转染技术获得稳定过表达CLDN1的A431细胞株，检测细胞内CLDN1表达水平以验证慢病毒转染效率。采用ATP发光活细胞检测法、流式细胞术和Transwell小室测定法分别检测过表达CLDN1后A431细胞的增殖、凋亡和迁移能力。结果 CLDN1在HacaT细胞中的表达高于A431细胞(P<0.05)。经慢病毒过表达载体，A431-VL2007稳转细胞株成功构建，qPCR和Western blot结果均表明该细胞株CLDN1表达显著增强(P<0.05)。与正常A431细胞株相比，CLDN1过表达后A431-VL2007细胞增殖能力和迁移能力均受到抑制(P<0.05);流式细胞检测结果显示，A431-VL2007细胞的凋亡比率显著高于正常A431细胞株(P<0.05)。结论 CLDN1过表达可以降低皮肤鳞癌细胞的增殖能力和迁移能力，并促进癌细胞凋亡，可能是皮肤鳞状细胞癌的潜在抗癌靶点。

关键词

紧密连接蛋白-1 / 人皮肤鳞癌细胞 / 稳定转染 / 细胞凋亡 / 细胞迁移