外源性TNF-α对血凝块中纤维结构直接作用的体外研究

摘要

目的 研究不同浓度肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor alpha, TNF-α)对血凝块(全血溶液/贫血小板血浆溶液)中纤维聚合反应的体外影响。方法 实验通过设立不同浓度TNF-α组(0、50、500 pg/mL),通过血栓弹力图仪(thromboelastograph, TEG)监测1.5 h内血凝块形成过程中反应时间、凝血时间、α角等指标；使用凝血和血小板功能分析仪检测全血凝血过程中凝血酶生成时间、纤维蛋白生成速率及血小板功能；生物力学测试仪检测全血/贫血小板血浆溶液血凝块充分形成(24 h)后凝块的杨氏模量；扫描电子显微镜(scanning electron microscope, SEM)直接观察全血/贫血小板血浆溶液血凝块纤维形态结构，采用Image J软件计算纤维的直径及孔隙率大小，检测TNF-α对血凝块纤维结构产生的直接影响。结果 低浓度TNF-α干预下提高了血凝块形成速率(P<0.05),增强凝血酶生成(P<0.05),高浓度TNF-α增强血小板功能(P<0.05)。TNF-α浓度增加增强了血凝块硬度(P<0.05),但高浓度TNF-α处理的贫血小板血浆溶液凝块在0.1 N压力下易破裂。TNF-α可降低纤维直径，形成更致密的纤维蛋白网络(P<0.000 1),低浓度TNF-α组孔隙率高于高浓度组(P<0.01),与TNF-α浓度呈反比。结论 TNF-α促进血液凝固，其中低浓度更有效，随浓度升高可增加血凝块硬度和抗形变能力，并减小纤维直径，降低纤维蛋白孔隙率，形成更致密的网络。

关键词

肿瘤坏死因子α / 血凝块力学性能 / 纤维结构 / 骨修复