PGK1琥珀酰化修饰调控ATP5A1介导神经元炎症因子参与癫痫发作

摘要

目的 探讨磷酸甘油酸激酶1(PGK1)琥珀酰化修饰是否通过ATP合成酶α亚基1(ATP5A1)介导神经炎症参与癫痫的发生。方法 本研究采用氯化锂-匹罗卡品诱导癫痫大鼠模型，通过慢病毒介导的基因修饰(K15R/K15E突变型PGK1过表达)和ATP5A1过表达干预，使用Racine评分、免疫印迹、免疫荧光、酶联免疫吸附测定(ELISA)及细胞转染等方法，系统探讨PGK1琥珀酰化对癫痫发生的调控机制。结果 与对照组及癫痫组相比，K15R突变组(pLV-K15R-EP)癫痫发作加重(Racine评分，P<0.05)。癫痫组海马ATP5A1蛋白表达显著下降(P<0.05),p-NF-κB/NF-κB活化增加(P<0.001),促炎因子IL-6表达升高，抗炎因子IL-10表达下降(P<0.05);K15R突变进一步促进上述变化(P<0.05)。ATP5A1过表达可抑制TNF-α诱导的p-NF-κB/NF-κB活化及IL-6、IL-10的表达(P<0.01);K15R突变联合ATP5A1过表达可以减轻癫痫发作(P<0.05)、抑制NF-κB活化(P<0.05),并恢复IL-6、IL-10的表达(P<0.001)。结论 PGK1琥珀酰化水平下降可以下调ATP5A1蛋白，从而激活NF-κB的过度磷酸化导致炎症因子释放促进癫痫形成。

关键词

磷酸甘油酸激酶1 / 琥珀酰化 / ATP合成酶α亚基1 / 核转录因子-κB / 癫痫