口服三叶苷在脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织不同分区的空间分布

摘要

目的 建立一种快速、便捷的高效液相色谱-质谱联用测定方法，用于检测三叶苷(TLB)在脑缺血再灌注损伤(CIRI)大鼠不同脑组织区域(皮质、海马、间脑、小脑)的含量及空间分布差异，并进行方法学考察。方法 采用Kinetex C18柱(150 mm×2.1 mm, 2.6μm),流动相A:0.1%甲酸水溶液，流动相B:0.1%甲酸乙腈溶液，梯度洗脱：0～4 min, 70%～10%A,4～5 min, 10%A～70%A,5～6 min, 70%A,设定流速为0.2 mL/min,进样体积为1μL,色谱柱温度条件为30℃。应用电喷雾离子化源(ESI),多反应监测模式(MRM)进行扫描，负离子模式下检测，检测离子对：TLBm/z 435.0、273.1,岩白菜素(内标)m/z 327.0、192.0。结果 方法学结果显示TLB在2～200 ng/mL(r=0.998 8)呈现良好的线性关系，在CIRI大鼠脑组织样本中，精密度、准确度、稳定性、基质效应、回收率等指标符合方法学要求。TLB给药后大鼠海马、小脑、间脑均未检测到TLB,皮质区域TLB含量为(4.33±2.30) ng/mL。结论 该方法操作简单、快速灵敏。可用于TLB治疗CIRI大鼠脑组织不同区域中TLB空间分布差异分析。为贵州省民族药甜茶活性成分TLB在治疗CIRI大鼠方面提供科学依据。

关键词

三叶苷 / 脑缺血再灌注损伤 / 高效液相色谱串联质谱 / 不同脑区 / 空间分布