不同浓度M2型巨噬细胞来源迁移体对骨髓间充质干细胞成骨分化效应的影响

摘要

目的 探讨不同浓度M2巨噬细胞来源迁移体对BMSCs成骨分化的剂量效应，为骨再生策略提供理论依据。方法 将不同浓度(0、20、40、60、80、100 ng/mL)M2巨噬细胞来源迁移体与鼠源BMSCs共培养，通过CCK-8实验检测细胞增殖，划痕实验评估细胞迁移能力，RT-qPCR和Western blot检测成骨相关因子(RUNX2、BMP2、ALP、OCN)表达，免疫荧光观察BMP2、ALP和OCN荧光强度，茜素红染色分析矿物质沉积。结果 迁移体对BMSCs的增殖和迁移能力具有一定的浓度依赖性促进作用，其中60 ng/mL迁移体组作用最为显著，细胞增殖和迁移能力均显著高于对照组及其他浓度组(P<0.05)。RT-qPCR和Western blot结果显示，60 ng/mL迁移体组可显著上调RUNX2、BMP2、和ALP的基因和蛋白表达(P<0.05)。免疫荧光显示，60 ng/mL迁移体干预后，BMP2、ALP和OCN荧光强度显著增强(P<0.001)。茜素红染色进一步证实，60 ng/mL迁移体组钙结节形成明显多于对照组。结论 M2型巨噬细胞来源迁移体可有效促进BMSCs的成骨分化，其中60 ng/mL迁移体具有最优的促成骨效应，可显著增强细胞增殖、迁移及成骨相关因子表达，并促进矿物质沉积。

关键词

迁移体 / M2型巨噬细胞 / 成骨细胞 / 骨髓间充质干细胞 / 成骨分化