基于LC-MS/MS法检测重楼中6种皂苷类成分蒸制前后的含量变化

摘要

目的 建立高效液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）检测重楼中6种皂苷类成分的含量（重楼皂苷Ⅰ、重楼皂苷Ⅱ、重楼皂苷H、重楼皂苷VⅡ、重楼皂苷V、纤细薯蓣皂苷）的方法，比较蒸制前后的含量变化，为民族药用重楼蒸制的科学性提供实验依据。方法 采用LC-MS/MS法，电喷雾离子源（ESI）,扫描多反应监测（MRM）模式。采用Phenomenex Kinetex C₁₈色谱柱（2.1×100 mm, 2.6μm）。流动相A（0.2%甲酸水溶液）-B（0.2%甲酸乙腈溶液）,梯度洗脱，流速为0.2 mL/min,进样量1μL;柱温：30℃。采用鲜重楼药材，经蒸制后，进行含量测定，比较重楼生品与蒸制品的含量变化。采用电子眼技术测定重楼生品与蒸制品的色度值。结果 重楼皂苷Ⅰ、重楼皂苷Ⅱ、重楼皂苷H、重楼皂苷Ⅶ、重楼皂苷V、纤细薯蓣皂苷在2.00～8.28 mg/L范围内呈良好线性关系（r>0.99）,日内精密度（n=6）、日间精密度（n=9）、稳定性、重复性RSD均小于5.00%,平均加样回收率在96.20%～104.30%,RSD为1.10%～4.10%。重楼蒸制品中6种皂苷含量较生品均下降。重楼蒸制后，整体颜色加深，其中明度值（L^*）、黄绿值（b^*）、总色值(E^*_ab)整体呈下降趋势，黄蓝值（a^*）整体呈上升趋势。结论 本研究所建立的LC-MS/MS法检测重楼中6种皂苷类成分的方法简便、快捷、重复性好，发现重楼蒸制后，6种皂苷类成分显著下降。重楼蒸制后，颜色发生变化，较生品颜色深。研究结果可为重楼蒸制品的科学性提供科学依据。

关键词

液相色谱-串联质谱方法 / 重楼 / 重楼皂苷 / 含量测定 / 蒸制