整合素-α2对人根尖牙乳头干细胞增殖、迁移及成骨分化的体外调控初步研究

摘要

目的 初步探索整合素-α2(ITGA2)对人根尖牙乳头干细胞(SCAP)增殖、迁移及成骨分化等生物学特性的体外调控作用。方法 采用慢病毒转染法构建稳定沉默ITGA2的SCAP细胞系；设置ITGA2沉默组为ITGA2(-)、空载体对照组为Control;以CFU-F检测克隆形成率、CCK-8检测生长曲线评估ITGA2对SCAP增殖能力的影响；通过划痕实验、Transwell实验评估迁移能力；利用流式细胞术(FCM)分析细胞凋亡率，qRT-PCR检测凋亡相关基因及干性基因的表达变化；成骨诱导后，采用ALP染色、ARS染色及钙化结节定量分析，评估其对SCAP成骨分化能力的影响。结果 沉默ITGA2后SCAP的增殖及迁移能力显著降低，FCM显示凋亡率在均值上有所升高，qRT-PCR结果显示抗凋亡基因BCL2及干性基因OCT4的表达均显著降低(P<0.05)。成骨诱导后，沉默组ITGA2(-)的ALP染色和ARS染色的着色程度相较空载体对照组更浅，钙化结节半定量分析显示其矿化程度显著降低(P<0.05)。结论 沉默ITGA2可抑制体外培养SCAP的增殖、迁移及成骨分化能力，同时也影响其凋亡过程及干性基因的表达。

关键词

整合素-α2 / 根尖牙乳头干细胞 / 细胞增殖 / 细胞迁移 / 细胞凋亡 / 成骨分化

基金资助

国家自然科学基金资助项目(NO:82460190); 遵义市科技创新团队建设项目(NO:遵KCTD051)