全反式维甲酸与卡非佐米通过ROS/Drp1/线粒体轴协同诱导急性髓系白血病细胞凋亡

摘要

目的 探讨全反式维甲酸(ATRA)协同蛋白酶体抑制剂卡非佐米(CFZ)抗急性髓系白血病(AML)的作用，并阐明其分子机制。方法 选用AML细胞系MV-4-11和U937,采用CCK-8法检测细胞活力，流式细胞术检测细胞凋亡与活性氧(ROS)水平，线粒体膜电位检测线粒体功能，Western blot分析凋亡相关蛋白和Bcl-2家族蛋白的表达。结果 ATRA/CFZ联用可协同抑制AML细胞增殖，并显著诱导细胞凋亡，引起PARP降解、Caspase-3和Caspase-9降解/激活，同时导致线粒体膜电位的下调。分子机制研究表明，ATRA/CFZ联用可抑制Bcl-2家族蛋白Mcl-1的表达，促进Bax的线粒体转位，进而导致细胞色素C(Cyto c)从线粒体释放至细胞质。进一步研究发现，ATRA/CFZ联用可抑制Drp1(Ser637)磷酸化水平，导致Drp1线粒体转位增加；Drp1抑制剂Mdivi-1预处理可阻断ATRA/CFZ联用介导的Drp1和Bax线粒体转位、Mcl-1的下调、Caspase-3/9降解/激活及细胞凋亡。此外，ATRA/CFZ联用可显著升高AML细胞内ROS水平，而ROS抑制剂NAC预处理可阻断ATRA/CFZ联用介导的Drp1去磷酸化及线粒体转位、Cyto c释放及细胞凋亡。结论 ATRA/CFZ联用通过诱导产生ROS,引起Drp1(Ser637)的去磷酸化，并促进Drp1向线粒体转位，导致线粒体损伤，进而引起Cyto c的释放，最终激活Caspase级联反应诱导AML细胞凋亡。

关键词

急性髓系白血病 / 全反式维甲酸 / 卡非佐米 / 细胞凋亡 / 活性氧 / 动力相关蛋白1