脾脏X线照射对脓毒症相关急性肝损伤的保护作用

摘要

目的 探讨脾脏低剂量X线照射对脓毒症相关急性肝损伤（SALI）的保护作用及其潜在机制。方法 采用经典的盲肠结扎穿刺术（CLP）建立脓毒症模型，以诱导产生脓毒症相关急性肝损伤（SALI）,并于术后6 h对脾脏进行局部X线照射。实验选取120只健康雄性SD大鼠，随机分为A、B两组（n=60）,A、B两组大鼠随机分为4个亚组（n=15）,分别为：假手术组（Sham组）、假手术组+脾脏照射组（Sham+Irra组）、模型组（CLP组）、CLP+脾脏照射组（CLP+Irra组）,其中Sham+Irra组和CLP+Irra组在模型建立后6 h进行脾脏照射。观察大鼠7 d存活率；计算脾脏系数；ELISA测定肝功能及肝脏炎症因子（IL-6、IL-1β、TNF-α）,化学法检测肝脏组织中亚铁离子(Fe²⁺)、谷胱甘肽（GSH）及丙二醛（MDA）水平；观察各组大鼠肝脏组织病理变化（HE染色）,透射电镜观察各组肝脏组织线粒体结构，免疫组织化学染色法（IHC）观察大鼠肝脏组织中的CD68及CD206表达情况，DHE染色检测大鼠肝脏组织中活性氧（ROS）表达水平；Western blotting法检测GPX4、ACSL4及SLC7A11蛋白表达情况。结果 与CLP组相比，CLP+Irra组能显著提高大鼠7 d存活率，并有效改善肝功能，减轻肝脏病理结构及线粒体损伤，降低肝脏促炎因子IL-6、IL-1β和TNF-α的水平（P<0.01）;同时促进肝脏巨噬细胞由M1型向M2型转化（P<0.01）;降低ROS、Fe²⁺和MDA水平并恢复GSH含量（P<0.01）。另外，与CLP组相比，CLP+Irra组上调SLC7A11与GPX4的表达，下调ACSL4的表达（P<0.01）。结论 脾脏X线照射可能通过抑制铁死亡的发生，对SALI发挥保护作用。

关键词

脓毒症相关急性肝损伤 / 脾脏X线照射 / 单核巨噬细胞 / 铁死亡