TFAP2A调控支气管肺发育不良相关基因ACSL1的作用机制

摘要

目的 探索转录因子TFAP2A调控支气管肺发育不良相关基因ACSL1的作用机制。方法 GSE8586 Affymetrix Human Genome U133 Plus 2.0 Array基因芯片数据集分析低胎龄早产儿脐带血BDP患儿RNA相对表达量；JASPAR线上数据库查找转录因子TFAP2A在ACSL1启动子区可能的结合位点；在BEAS-2B细胞中过表达和敲低TFAP2A,利用ChIP实验和双萤光素酶报告基因实验验证TFAP2A结合并激活ACSL1 mRNA的转录情况，利用RT-qPCR和WB实验，检测TFAP2A、ACSL1 mRNA和蛋白表达情况。结果 在BDP患儿RNA-Seq数据中，发现ACSL1、TFAP2A mRNA表达量显著增加；JASPAR线上数据库发现转录因子TFAP2A在ACSL1启动子区存在的结合位点。双萤光素酶报告基因实验显示过表达TFAP2A显著增加ACSL1启动子萤光素酶活性，且随着浓度呈剂量依赖增加；反之降低。过表达TFAP2A,TFAP2A及ACSL1 mRNA水平和蛋白表达量升高。小干扰TFAP2A,TFAP2A及ACSL1 mRNA和蛋白表达量下降。结论 ACSL1启动子区可与TFAP2A特异性结合，TFAP2A正向调控ACSL1基因表达，增加了调控支气管肺发育不良重要基因的转录因子成员。

关键词

支气管肺发育不良 / 转录调控 / TFAP2A蛋白 / 早产儿