NPS-2143对胶质瘤增殖与迁移能力的影响及机制

摘要

目的 探究NPS-2143对胶质瘤U87、U251和Hs683细胞增殖与迁移能力的影响及机制。方法 将胶质瘤细胞分为3组，不加药物的对照组(Control组)、6μmol/L和8μmol/L NPS-2143处理组，通过细胞增殖实验CCK-8和细胞平板克隆形成实验检测不同浓度NPS-2143对U87和U251细胞活力与增殖的影响，通过流式细胞术实验检测不同浓度NPS-2143对细胞周期和凋亡的影响，Western blot检测细胞凋亡相关蛋白(Bax、Caspase 3)和细胞周期相关蛋白(P21、Cyclin D1)的表达水平；通过细胞划痕实验和细胞迁移实验检测NPS-2143对U87和Hs683细胞迁移的影响，Western blot法检测上皮间质转化(EMT)相关蛋白(N-cadherin、MMP2、MMP9)的表达水平；通过透射电镜观察NPS-2143对U87细胞中自噬囊泡数量的影响，Western blot检测细胞自噬相关蛋白(LC3、P62)和AKT-mTOR信号通路相关蛋白(p-AKT、p-mTOR)的表达水平。结果 与Control组比较，NPS-2143处理组胶质瘤细胞活力与增殖能力降低，且呈时间、浓度依赖性(P<0.01);与Control组比较，NPS-2143处理组胶质瘤细胞G1期细胞比例和凋亡细胞比例升高(P<0.05);与Control组比较，NPS-2143处理组胶质瘤细胞中P21蛋白表达水平增加，Cyclin D1蛋白表达水平下降，细胞凋亡蛋白Bax和Caspase 3表达水平增加(P<0.01);与Control组比较，NPS-2143抑制胶质瘤细胞的迁移能力(P<0.01),胶质瘤细胞中N-cadherin、MMP2、MMP9的表达水平降低(P<0.01),LC3、P62、p-AKT、p-mTOR蛋白表达水平升高(P<0.01);与Control组比较，NPS-2143使胶质瘤细胞内自噬囊泡增加(P<0.01)。结论 NPS-2143能抑制胶质瘤的增殖与迁移，其机制可能与激活AKT-mTOR通路有关。

关键词

胶质瘤 / NPS-2143 / 自噬 / 化疗 / 上皮间质转化

基金资助

国家自然科学基金(82060775); 贵州省科技项目(黔科合基础-ZK[2021]一般563)