环维黄杨星D对醛固酮诱导型心肌肥厚和凋亡的保护作用及机制

摘要

目的 探讨环维黄杨星D (CVB-D)对醛固酮(ALD)诱导的心肌肥厚和凋亡的保护作用及机制。方法 在C57BL/6小鼠和原代新生大鼠心肌细胞(PNRCMs)中用ALD构建心肌肥厚模型，分为对照组(Control组)、模型组(ALD组)、CVB-D低剂量组(CVB-D.L组)、CVB-D高剂量组(CVB-D.H组)及阳性药螺内酯组(Spir.组);通过超声心动图检测心功能指标左心室射血分数(LVEF)和左心室缩短分数(LVFS),采用HE、Masson和小麦胚芽凝集素荧光(WGA)染色观察小鼠心脏病理变化，MTT检测PNRCMs的细胞活力，吉姆萨染色和乳酸脱氢酶(LDH)检测PNRCMs损伤，cTnT染色观察PNRCMs的表面积，Western blot检测肥厚相关蛋白ANP和BNP、凋亡相关蛋白Bax、Bcl2和Caspase3、Sirt3及PPARγ蛋白的表达水平；使用Sirt3的过表达载体(Ad-Sirt3)进一步分析肥厚ANP、BNP与凋亡相关蛋白Bax、Bcl2及Caspase3的表达。结果 与Control组相比，ALD组小鼠心功能受损，LVEF和LVFS均下降，心脏组织纤维排列紊乱、胶原沉积，心肌细胞活力降低，表面积增大，ANP、BNP、Bax、Caspase3蛋白的表达增加(P<0.05),Sirt3、PPARγ和Bcl2蛋白的表达降低(P<0.05);与ALD组相比，CVB-D显著增强心功能，改善心脏病理变化，提高细胞活力(P<0.05),降低心肌细胞表面积，下调ANP、BNP、Bax、Caspase3蛋白的表达(P<0.05),上调Sirt3、PPARγ和Bcl2蛋白的表达(P<0.05);进一步使用Ad-Sirt3的结果表明Ad-Sirt3能促进CVB-D逆转肥厚和凋亡相关蛋白的表达(P<0.05)。结论 CVB-D减轻ALD诱导的心肌肥厚，抑制心肌细胞凋亡，其机制可能与调节Sirt3/PPARγ信号通路相关。

关键词

环维黄杨星D / 醛固酮 / 心肌肥厚 / 细胞凋亡 / 沉默信息调节因子3 / 过氧化物酶体增殖物激活受体γ