多不饱和脂肪酸对Δ15 Des转基因小鼠睾丸结构和功能的影响及机制

摘要

目的 探讨多不饱和脂肪酸(PUFAs)对Δ15脂肪酸去饱和酶(Δ15 Des)转基因小鼠睾丸结构和功能的影响及机制。方法 取C57BL/6野生型(WT)雄性小鼠和Δ15 Des转基因雄性小鼠分别作为对照组(n=5,WT组)和实验组(n=5,TG组),均饲喂含6%花生四烯酸(ARA)饲料8周，麻醉处死，分离睾丸组织及附睾组织，采用气相色谱(GC)检测睾丸组织中脂肪酸的组成及含量，采用精子质量分析仪(CASA)检测附睾组织中精子形态及运动活力[精子总活力、直线运动精子活力、精子平均路径速度(VAP)、精子曲线速度(VCL)及精子直线速度(VSL)],采用苏木精-伊红(HE)染色观察睾丸组织的形态学特征，采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测2组小鼠睾丸组织中游离脂肪酸受体1(FFAR1)、FFAR2、FFAR3、FFAR4及过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)、PPARβ、PPARγ信使RNA(mRNA)的表达，采用蛋白质印迹法检测2组小鼠睾丸组织中FFAR4和PPARγ蛋白的水平。结果 与WT组相比，TG组小鼠睾丸组织中ARA与二十二碳四烯酸(DTA)含量降低(P<0.05或P<0.01),亚油酸(LA)、二十碳五烯酸(EPA)、二十二碳六烯酸(DHA)含量升高(P<0.05或P<0.01);2组小鼠的精子形态及数量无明显差异，TG组小鼠精子的直线运动精子活力、VSL较WT组升高(P<0.05),精子总活力、VAP、VCL无差异(P>0.05);与WT组相比，TG组小鼠睾丸组织曲细精管内空泡较少，成熟精子增多；与WT组相比，TG组小鼠睾丸组织中FFAR4、PPARα mRNA表达上调(P<0.01或P<0.05),PPARβ mRNA表达下调(P<0.05),FFAR4蛋白水平增加(P<0.05)。结论 n-3 PUFAs可改善Δ15 Des转基因小鼠睾丸组织的结构和功能，其机制可能与结合FFAR4、激活下游信号分子有关。

关键词

脂肪酸类,不饱和 / 花生四烯酸 / 过氧化物酶体增殖物激活受体 / 精子能动性 / 多不饱和脂肪酸 / 游离脂肪酸受体4 / 精子形态