新型抗菌肽Mt-22S3对白念珠菌细胞的作用及机制

摘要

目的 探讨家蝇抗真菌肽-1A(MAF-1A)突变体-22S3(Mt-22S3)对白念珠菌(C.albicans)细胞的作用及机制。方法 取对数生长期的C.albicans菌悬液，分别与0、125、250及500 mg/L Mt-22S3作用12 h,采用荧光显微技术及荧光检测法观测Mt-22S3作用C.albicans后细胞内活性氧(ROS)的变化；以荧光检测法测定Mt-22S3作用C.albicans后细胞内线粒体膜电位水平的变化；通过Annexin V-FITC/PI双染法，观察Mt-22S3对C.albicans细胞凋亡的影响；以琼脂糖凝胶电泳阻滞实验分析Mt-22S3对C.albicans细胞DNA的影响。结果 经Mt-22S3作用的C.albicans细胞内ROS增高，且随着Mt-22S3浓度升高，细胞内ROS上升(P<0.05);线粒体膜电位检测发现，经Mt-22S3作用的C.albicans线粒体膜电位下降(P<0.01);Mt-22S3可引起C.albicans细胞凋亡及细胞坏死的发生，且Mt-22S3浓度越高，细胞凋亡及细胞坏死现象越明显；凝胶阻滞实验结果显示，Mt-22S3与C.albicans DNA孵育后产生明显的凝胶阻滞现象。结论 Mt-22S3可进入C.albicans细胞内发挥抗菌作用，其机制与诱导细胞内ROS积累、去极化线粒体膜、诱导细胞凋亡和死亡、结合DNA等有关。

关键词

白念珠菌 / 活性氧 / 细胞凋亡 / 抗菌肽 / 线粒体膜电位 / DNA凝胶阻滞