NRG4基因对胶质瘤细胞的增殖、迁移及侵袭的影响

摘要

目的 探讨神经调节蛋白4 (NRG4)对神经胶质瘤细胞的增殖、迁移以及侵袭作用的影响及机制。方法 采用逆转录-定量聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测神经胶质瘤患者(研究组)、对照组(同期健康志愿者)血清以及星形胶质细胞HA、神经胶质瘤细胞系U251、SHG44、LN229及T98G中NRG4和人表皮生长因子受体4(ErbB4)mRNA表达水平；将U251细胞分为Control组(空白对照)、NC组(转染不带RNA的质粒)、si-NRG4组(转染si-NRG4)和si-NRG4+ErbB4组[转染si-NRG4和ErbB4过表达质粒(pcDNA-ErbB4)]4组，通过细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测细胞增殖情况，划痕愈合实验和Transwell实验分析U251细胞的迁移与侵袭能力变化，免疫印迹(Western blot)检测PI3K/AKT通路中关键蛋白磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)中p110α、p110β亚型、磷酸化丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(pAKT)中ser473和thr308 a以及蛋白激酶(AKT)表达水平。结果 研究组血清中NRG4和ErbB4 mRNA表达量明显高于对照组(P<0.000 1),神经胶质瘤细胞系U251中NRG4和ErbB4 mRNA相对表达量最高；与NC组比较，si-NRG4组中NRG4基因表达下调，不仅抑制U251细胞的增殖、迁移与侵袭，还降低了PI3 K-p110α, pAKT-ser473 and pAKT-thr308蛋白表达(P<0.05)。结论 抑制NRG4表达可以减缓磷脂酰肌醇有关的信号通路PI3K/AKT通路的激活，抑制U251细胞的增殖和迁移，促进U251细胞凋亡，因此NRG4有可能成为治疗胶质瘤的潜在靶点。

关键词

NRG4 / ErbB4 / PI3K/AKT / 神经胶质瘤细胞 / 增殖 / 迁移 / 侵袭