NDNF低表达对博来霉素致肺纤维化小鼠炎症反应、氧化应激和EMT的影响

摘要

目的 探讨神经元源性神经营养因子(NDNF)低表达对博来霉素致肺纤维化小鼠肺炎症反应、氧化应激和上皮-间质转分化(EMT)的影响。方法 采取气管注入博来霉素(5 mg/kg)构建肺纤维化小鼠模型(肺纤维化组)、尾静脉注射siRNA-NDNF腺病毒载体建立NDNF低表达肺纤维化组(siRNA-NDNF组)、同时设置空载体组及健康组；于造模成功后2周时，采用HE及Masson染色观察小鼠肺组织病理变化(肺泡炎症评分)和肺纤维程度(肺纤维化占比),ELISA法检测肺组织炎性因子[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、白细胞介素(IL)-4和IL-6]、氧化应激因子[丙二醛(MDA)、活性氧(ROS)和超氧化物歧化酶(SOD)]及羟脯氨酸(HYP)水平，Western blot检测各组小鼠肺组织EMT相关蛋白[E-钙黏蛋白(E-cadherin)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Snail1和Collagen I]表达。结果 肺纤维化组小鼠肺泡结构破坏程度严重、肺泡残缺严重、明显炎症浸润、大面积胶原纤维沉积，肺系数、肺纤维化占比、肺泡炎症评分和肺组织HYP水平均高于健康组(P<0.05);siRNA-NDNF组小鼠肺泡结构损伤、炎性浸润和胶原纤维蓝色区域较空载体组减少，肺系数、肺纤维化占比、肺泡炎症评分和肺组织HYP水平低于空载体组(P<0.05);肺纤维化组小鼠肺组织TNF-α、TGF-β1、IL-6、IL-4、MDA、ROS水平和α-SMA、Snail1、Collagen I蛋白表达均高于健康组(P<0.05),肺组织SOD水平和E-cadherin蛋白表达低于健康组(P<0.05);siRNA-NDNF组小鼠肺组织TNF-α、TGF-β1、IL-6、IL-4、MDA、ROS水平和α-SMA、Snail1、Collagen I蛋白表达均低于空载体组(P<0.05),肺组织SOD水平和E-cadherin蛋白表达高于空载体组(P<0.05)。结论 低表达NDNF可以改善小鼠肺纤维化损伤，其机制可能与减轻炎症及氧化应激反应、调节肺EMT相关蛋白表达有关。

关键词

肺纤维化 / 博来霉素 / 神经元源性神经营养因子 / 上皮-间质转分化 / 炎症反应