肠病药方调控PI3K/AKT/NF-κB信号通路改善溃疡性结肠炎的研究

摘要

目的 探讨肠病药方调控磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/核因子kappa B(NF-κB)信号通路对抗溃疡性结肠炎(UC)的作用机制。方法 42只C57BL/6小鼠随机分为正常对照组(n=6, Control组，自由饮去离子水)、模型组(n=12, DSS组)、美沙拉嗪组(n=12, MES组)及肠病药方组(n=12, CBD组),后3组小鼠自由饮用3%葡聚糖硫酸钠(DSS)溶液7 d诱导UC模型，后两组同期灌胃美沙拉嗪或肠病药方，前两组灌胃等体积去离子水；观察实验期间小鼠体质量改变，评测小鼠疾病活动指数(DAI);造模结束后麻醉处死小鼠，测量结肠长度、观察结肠内容物及黏膜，采用苏木素-伊红(HE)染色观察各组小鼠结肠病理组织学变化，酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组小鼠结肠组织匀浆白细胞介素-6 (IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平，蛋白免疫印迹法(WB)检测各组小鼠结肠组织中磷酸化PI3K(p-PI3K)-p85、磷酸化AKT1(p-AKT1)、磷酸化NF-κB (p-NF-κB)-p65蛋白表达，实时荧光定量PCR技术(qRT-PCT)检测各组小鼠结肠组织PI3K、AKT、NF-κB信使RNA(mRNA)表达水平。结果 与DSS组比较，CBD组治疗后，有效缓解UC小鼠症状，粪便性状及便血情况改善，结肠黏膜炎症浸润减少，体质量下降有所缓解，DAI评分降低及结肠长度接近正常，结肠组织匀浆中IL-6、TNF-α表达降低(P<0.05),p-PI3K-p85、p-AKT1、p-NF-κB-p65蛋白及mRNA表达明显减少(P<0.05)。结论 肠病药方可缓解UC小鼠的症状、减轻结肠黏膜损伤，其机制可能与调解结肠组织中PI3K/AKT/NF-κB信号通路中相关蛋白质及mRNA表达、降低结肠组织炎症因子表达有关。

关键词

肠病药方 / 溃疡性结肠炎 / 白细胞介素-6 / 肿瘤坏死因子-α / 磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/核因子kappa B