核纤层蛋白A基因通过MAPK通路调控胃癌细胞HGC27的增殖、迁移及凋亡

摘要

目的 探究敲低核纤层蛋白A基因(LMNA)对人胃癌细胞HGC27的增殖、迁移及凋亡的影响和可能的作用机制。方法 通过生信分析LMNA基因在胃正常组织与胃癌组织中的表达情况；取对数生长期的人胃癌细胞HGC27,根据是否敲低LMNA基因分为敲低LMNA组(si-1、si-2、si-3组)和对照组(si-NC组)共4组，取瞬时转染率最高的si-2组为si-LMNA组；采用CCK-8实验检测细胞活力，Transwell和划痕实验检测细胞的侵袭迁移能力，流式检测细胞凋亡和细胞周期，Western blot检测凋亡相关蛋白Bax、Caspase3、Bcl-2和丝裂源活化蛋白激酶(MAPK)通路中的p38、p-p38、ERK1/2及pERK1/2的表达；在si-LMNA组加入MAPK通路的特异性激活剂Chicoric acid,进一步验证LMNA的表达情况。结果 生信分析结果提示LMNA基因在胃癌组织中高表达，LMNA低表达患者生存率更高；与si-NC组相比，si-LMNA组细胞活力下降(P<0.05),凋亡蛋白Bax、Caspase3表达升高、抗凋亡蛋白Bcl-2降低及细胞凋亡率增加(P<0.05),细胞周期阻滞在G0/G1期、S期细胞减少(P<0.05),侵袭与迁移能力降低(P<0.05),p38、ERK1/2磷酸化水平降低(P<0.05);加入激活剂后，LaminA/C表达量增高，p38、ERK1/2磷酸化水平升高，凋亡相关蛋白的表达被逆转，侵袭迁移能力被促进(P<0.05)。结论 敲低LMNA基因后能促进胃癌细胞的凋亡，细胞周期被阻滞在G0/G1期，增殖、侵袭及迁移能力被抑制，其作用机制可能与MAPK信号通路密切相关。

关键词

核纤层蛋白A基因 / 细胞 / 胃肿瘤 / 丝裂源活化蛋白激酶信号通路 / 增殖 / 迁移