miR-126阳离子纳米乳的制备及初步药效

摘要

目的 采用阳离子纳米乳（CNE）载miRNA-126（miR-126）形成miR-126阳离子纳米乳递送系统（CNE-miR126）,并对其药剂学性能、时间稳定性、血清稳定性、细胞毒性、细胞摄取及血管黏附分子-1（VCAM-1）蛋白表达量进行评估。方法 用琼脂糖凝胶电泳考察CNE和miR-126的最佳氮磷比（N/P）,采用纳米粒度及Zeta电位分析测量仪测定其粒径和进行药剂学性能评价；在4℃条件下，评估CNE-miR-126在1周内粒径及电位的稳定性；用血清稳定性实验评估CNE-miR-126在48 h之内的稳定性，MTT法评估CNE-miR-126的细胞毒性；流式细胞术和荧光显微镜观察人脐静脉内皮细胞（HUVECs）对CNE-miR-126的摄取情况，免疫蛋白质印迹法（Weston blot）检测CNE-miR-126对由脂多糖（LPS）致炎的HUVECs中VCAM-1的表达水平。结果 CNE与miR-126最佳N/P为16∶1,CNE-miR-126外观基本圆整、平均粒径(D₅₀)为（144.79±1.85）nm、Zeta电位为（22.92±1.24）mV;CNE-miR-126在1周内粒径及电位稳定性良好，且在48 h之内血清稳定性良好；在10^-6～1 nmol/L浓度内对HUVECs细胞生长无明显抑制作用，能够促进HUVECs对miR-126的摄取；Weston blot结果显示，与Control组相比，LPS（1 mg/L）处理细胞8 h后VCAM-1蛋白水平显著升高（P<0.01）;与Model组相比，CNE-miR-126组预处理24 h后VCAM-1蛋白水平降低（P<0.05）。结论 CNE-miR-126粒径适宜，稳定性良好，可降低VCAM-1蛋白的表达，可为心血管疾病的治疗提供参考。

关键词

阳离子纳米乳 / miRNA-126 / 基因递送 / 细胞摄取 / 人脐静脉内皮细胞