抗肿瘤肽Mt5对人肝癌细胞增殖和凋亡的影响及机制

摘要

目的 探讨抗肿瘤肽Mt5通过磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路对人肝癌细胞增殖与凋亡的影响。方法 采用pymol构建Mt5的三维可视化结构示意图，Prot Param分析Mt5的正电荷和疏水性，NPS分析Mt5的α-螺旋所占比例；运用实时无标记细胞分析(RTCA)技术检测不同浓度Mt5(50 mg/L、100mg/L、200 mg/L、400 mg/L)作用后的HepG2细胞活力；通过实时荧光定量PCR法(qRT-PCR)法检测不同浓度Mt5(25 mg/L、50 mg/L、100 mg/L)作用后HepG2细胞中PI3K、AKT信使RNA(mRNA)表达；以Western blot法检测不同浓度Mt5(25 mg/L、50 mg/L、100 mg/L)作用后凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤-2蛋白(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(bax)和PI3K、AKT蛋白表达。结果 生物学信息结果表明，Mt5的正电荷为+8,疏水性为0.588,α-螺旋度为84.62%;RTCA结果显示Mt5不同浓度处理组作用后，HepG2细胞指数随着Mt5浓度的增大和时间的延长逐渐降低至0以下；qPCR结果显示，Mt5组HepG2细胞中PI3K和AKT mRNA较阴性对照组表达降低(P<0.05),bax蛋白表达较阴性对照组升高(P<0.05),且呈浓度依赖性；Western blot结果显示，Mt5组HepG2细胞中Bcl-2、PI3K及AKT蛋白表达较阴性对照组降低(P<0.05),且呈浓度依赖性。结论 Mt5可抑制人肝癌细胞增殖及诱导细胞凋亡，其机制可能与抑制PI3K/AKT信号通路有关。

关键词

细胞增殖 / 细胞凋亡 / 抗肿瘤肽Mt5 / PI3K/AKT信号通路 / HepG2细胞 / 抗肿瘤活性

基金资助

贵州省科技计划项目(黔科合支撑[2020]4Y236); 贵州省教育厅滚动支持省属高校科研平台团队项目(黔科合支撑[2020]019); 西南喀斯特区域病原微生物防治学科创新引智基地(D20009)