LncRNA GAS5通过miR-182-5p/FOXF2轴对口腔鳞状细胞癌细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭的影响

摘要

目的 探讨长链非编码RNA生长停滞特异性转录本5(LncRNA GAS5)调节微小RNA-182-5p(miR-182-5p)/叉头盒蛋白F2(FOXF2)对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡的影响。方法 收集45例确诊为OSCC的癌组织以及癌旁组织，体外培养人口腔上皮细胞系HOEC及人OSCC细胞系CAL-27、HSC-3、SCC-25,qRT-PCR检测组织、细胞中LncRNA GAS5、miR-182-5p、FOXF2的表达；择细胞株CAL-27分为ctrl组、pcDNA组、pcDNA-GAS5组、pcDNA-GAS5+miR-NC组及pcDNA-GAS5+miR-182-5p mimics组，采用CCK-8试剂盒检测细胞增殖活性，Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力，流式细胞术检测细胞凋亡水平，Western Blot检测癌细胞中FOXF2、bax、Bcl-2、cleaved caspase-3及E-cadherin蛋白表达，双萤光素酶报告实验验证miR-182-5p与LncRNA GAS5、FOXF2的关系。结果 与癌旁组织相比，OSCC组织中LncRNA GAS5、FOXF2 mRNA表达降低，miR-182-5p表达升高(P<0.05);CAL-27、HSC-3、SCC-25细胞与HOEC相比，LncRNA GAS5、miR-182-5p、FOXF2表达趋势与OSCC组织内一致，且在CAL-27表达最明显，选择其作为后续实验的细胞株；与ctrl组、pcDNA组比较，pcDNA-GAS5组CAL-27细胞中GAS5、FOXF2 mRNA、细胞凋亡率及BAX、E-cadherin蛋白表达升高(P<0.05),miR-182-5p表达、细胞增殖、迁移和侵袭数及Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05);上调miR-182-5p可减弱过表达LncRNA GAS5对CAL-27细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用，也可抑制癌细胞凋亡；LncRNA GAS5靶向负调控miR-182-5p表达，miR-182-5p靶向负调控FOXF2表达。结论 上调GAS5可能通过抑制miR-182-5p来增加FOXF2表达，进而抑制CAL-27细胞增殖、迁移及侵袭，促进CAL-27细胞的凋亡。

关键词

长链非编码RNA GAS5 / miR-182-5p / 叉头盒蛋白F2 / 口腔鳞癌 / 细胞增殖 / 凋亡 / 迁移和侵袭