人β防御素3对绿色荧光蛋白标记水疱性口炎病毒复制的作用

摘要

目的 探讨人β防御素-3(HBD3)对绿色荧光蛋白(GFP)-水疱性口炎病毒(VSV)病毒株复制的作用。方法 取对数生长期非洲绿猴肾细胞(Vero)分为Control组、1.00感染复数(MOI)组、0.10 MOI及0.01MOI组，Control组为无病毒对照组，后3组Vero细胞用1.00 MOI、0.10 MOI、0.01MOI VSV-GFP感染，采用噬斑形成实验观察感染第3天时各组Vero细胞存活情况，采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)检测感染24 h时1.00、0.10及0.01 MOI组Vero细胞内病毒基质蛋白(M)和GFP信使RNA(mRNA)表达；取对数生长期人非小细胞肺癌细胞(A549)分为未处理组、VSV-GFP组及VSV-GFP+HBD3组，采用Imag J软件对各组镜下A549荧光进行相对定量分析，使用RT-PCR检测各组A549细胞内M和GFP mRNA表达。结果 随着病毒滴度的增加，Vero细胞内空斑形成数目增多；Vero细胞内M和GFP mRNA表达表现为0.01 MOI组<0.10 MOI组<1.00 MOI组(P<0.05);VSV-GFP+HBD3组A549细胞单位面积内的荧光强度较VSV-GFP组减弱(P<0.05),M和GFP mRNA表达较VSV-GFP组降低(P<0.05)。结论 HBD3可抑制VSV-GFP进入细胞后的病毒复制。

关键词

水疱性口炎 / 病毒 / 感染 / 病毒复制 / 抗菌肽 / 人β防御素-3 / 抗病毒