MIR22HG对肺炎支原体诱导RAW246.7细胞凋亡的影响及分子机制

摘要

目的 探讨MIR22HG对肺炎支原体诱导的RAW246.7细胞凋亡的影响及分子机制。方法 培养小鼠巨噬细胞RAW246.7,将其分为空白对照组(RAW246.7+10μL磷酸盐缓冲液)、模型细胞(RAW246.7+10μL肺炎支原体菌株)、模型细胞+si-NC组(RAW246.7+10μL肺炎支原体菌株+转染MIR22HG干扰载体阴性对照)和模型细胞+si-MIR22HG组(RAW246.7+10μL肺炎支原体菌株+转染MIR22HG干扰载体);采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测MIR22HG表达水平，细胞计数试剂盒8(CCK-8)和EdU染色检测细胞增殖，流式细胞术检测细胞凋亡，酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6 (IL-6)水平，蛋白印迹法测定caspase-9、Bax、p-p65、caspase-3及p-IκBα蛋白表达。结果 肺炎支原体诱导的RAW246.7细胞中MIR22HG水平增加，细胞活性和EdU阳性细胞比率下降、凋亡增加，TNF-α、IL-6水平升高，Bax、caspase-9、caspase-3表达水平升高，Bcl-2表达水平降低，p-p65、p-IκBα水平增加，差异有统计学意义(P<0.05);敲减MIR22HG后，细胞活性、EdU阳性细胞比率和Bcl-2表达增加，凋亡率、IL-6、TNF-α水平、caspase-9、Baxp-p65、caspase-3、p-IκBα表达水平降低，差异有统计学意义(P<0.05)。结论 敲减MIR22HG可能通过下调NF-κB信号通路抑制肺炎支原体诱导的RAW246.7细胞炎症反应和凋亡。

关键词

MIR22宿主基因 / 肺炎支原体 / RAW246.7细胞 / 细胞凋亡 / 炎症反应