抑制miR-130a表达对SACC-83顺铂化疗敏感性及XIAP MDR1蛋白表达的影响

摘要

目的 研究抑制miR-130a表达对人涎腺腺样囊性癌细胞株(SACC-83)顺铂(DDP)化疗敏感性及X染色体连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)、多药耐药基因(MDR1)表达的影响。方法 构建人涎腺腺样囊性癌DDP耐药细胞株(SACC-83/DDP),采用实时荧光定量(qRT-PCR)检测SACC-83、SACC-83/DDP细胞中miR-130a表达水平；将SACC-83/DDP细胞随机分为对照组、mir-130a inhibitor组(转染mir-130a inhibitor)、DDP+mir-130a inhibitor阴性对照组(30μmol/L DDP+转染mir-130a inhibitor阴性对照)及DDP+mir-130a inhibitor组(30μmol/L DDP+转染mir-130a inhibitor),采用CCK-8法测定各组细胞生存率以及对DDP的耐药性，流式细胞术检测细胞凋亡率，TUNEL染色检测细胞凋亡指数；qRT-PCR检测细胞miR-130a、XIAP、MDR1、PTEN mRNA水平，免疫印记法检测细胞XIAP、MDR1、PTEN蛋白表达。结果 与SACC-83细胞相比，miR-130a在SACC-83/DDP细胞中高表达(P<0.05);与对照组和mir-130a inhibitor组相比，DDP+mir-130a inhibitor组细胞生存率降低，凋亡率和凋亡指数升高(P<0.05);与mir-130a inhibitor组相比，DDP+mir-130a inhibitor组细胞生存率降低，凋亡率和凋亡指数升高(P<0.05);与对照组相比，mir-130a inhibitor组、DDP+mir-130a inhibitor组细胞miR-130a水平、XIAP mRNA及蛋白、MDR1 mRNA及蛋白表达降低(P<0.05),凋亡率、凋亡指数和PTEN蛋白表达升高(P<0.05);与DPP+mir-130a inhibitor组相比，DDP+mir-130a inhibitor阴性对照组细胞miR-130a水平、XIAP mRNA及蛋白、MDR1 mRNA及蛋白表达升高(P<0.05),凋亡率、凋亡指数和PTEN蛋白表达下降(P<0.05);SACC-83/DDP细胞对DDP的耐药性明显高于SACC-83细胞，抑制miR-130a表达逆转了SACC-83/DDP细胞的DDP耐药性。结论 抑制miR-130a表达，可能下调XIAP表达，增强人涎腺腺样囊性癌细胞株对顺铂化疗的敏感性。

关键词

miR-130a / X染色体连锁凋亡抑制蛋白 / 人涎腺腺样囊性癌细胞株 / 顺铂 / 化疗敏感性